雌禽性成熟前,在股骨和胫骨骨髓腔中新生大量针状骨,称之为髓质骨。髓质骨的产生与体内雌激素浓度升高有关,并伴随着整个产蛋期而存在。在产蛋周期中,髓质骨进行周期性吸收和重建,为蛋壳钙化提供钙源。髓质骨反复地吸收与重建,最终使皮质骨变薄、蛋鸡发生骨质疏松。本文通过雌激素和抗雌激素药物来研究其对蛋鸡髓质骨形成的影响,并进一步探讨其机理,为蛋鸡骨质疏松症防治提供理论依据。试验Ⅰ雌二醇对鸡髓质骨形成及其受体表达的影响本试验研究了雌激素对青年蛋鸡髓质骨形成的诱导作用及其对雌激素受体表达的影响。14周龄135羽公鸡,115羽母鸡预饲1周后,各随机杀5只采骨骼样品,然后将剩余的公、母鸡各随机平均分为两组,A组为公鸡对照组,B组为公鸡试验组、肌注17β-雌二醇2 mg/d；C组为母鸡对照组,D组为母鸡试验组、口服来曲唑0.5 mg/d,试验为期18 d。在试验开始和试验过程中采集骨组织用于骨切片制作。试验结果显示,A组未见髓质骨产生；B组在试验第6天开始产生髓质骨,C组约在性成熟前10 d左右开始出现髓质骨,D组未见髓质骨产生。雌激素免疫组化结果表明,试验开始时,A、B组雌激素受体表达量极显著低于C、D组(P<0.01);实验结束时,B、C组之间比较,雌激素受体表达量差异不显著,但极显著高于A(P<0.01)；D组试验结束时未见雌激素受体表达。结论：雌激素可以诱导雌激素受体大量表达,促进髓质骨产生。试验Ⅱ青年蛋鸡骨超微结构研究及其在髓质骨形成过程中的变化本试验研究了青年蛋鸡骨骼的超微结构形态及髓质骨形成过程中的骨超微结构的变化。14周龄135羽公鸡,115羽母鸡预饲1周后,各随机杀5只采骨骼样品,然后将剩余的公、母鸡各随机平均分为两组,A组为公鸡对照组,B组为公鸡试验组、肌注17β-雌二醇2 mg/d；C组为母鸡对照组,D组为母鸡试验组、口服来曲唑0.5 mg/d,试验为期18 d。在试验开始和试验过程中采集骨组织用于电镜扫描观察。试验结果显示,在扫描电镜下,骨小梁呈表面粗糙的板状,表面有成骨细胞和破骨细胞附着；成骨细胞呈小颗粒状,颜色稍亮；破骨细胞体积较大,多为团状、片状、条状；骨盐晶体成片状生长在骨小梁表面。在髓质骨形成期间,骨小梁表面有大量成骨细胞附着,破骨细胞相对较少。结论：髓质骨形成主要以成骨方式进行,与成骨细胞关系密切。试验Ⅲ髓质骨形成对骨形态计量学及骨放射密度的影响本试验研究了蛋鸡髓质骨形成阶段其骨形态计量学和骨密度的变化。14周龄135羽公鸡,115羽母鸡预饲1周后,各随机杀5只采骨骼样品,然后将剩余的公、母鸡各随机平均分为两组,A组为公鸡对照组,B组为公鸡试验组、肌注17β-雌二醇2 mg/d；C组为母鸡对照组,D组为母鸡试验组、口服来曲唑0.5 mg/d,试验为期18 d。在试验开始时和试验过程中采集骨组织用于骨形态计量学和骨放射密度的测定。结果显示,A、B组骨皮质指数差异不显著,C组显著低于D组(P<0.05)；A组皮质骨面积显著大于B、C和D组(P<0.05)；A组皮质骨面积百分率与其他各组相比差异不显著,B组显著高于C组(P<0.05)；C、D组之间差异不显著。A、B组比较,骨放射密度差异不显著,但A组显著高于D组(P<0.05),B组显著高于C和D组,C组显著高于D。结论：髓质骨形成之初对皮质骨没有影响,髓质骨具有一定的放射密度。雌、雄激素均可促进骨骼生长,但雄激素作用强于雌激素；来曲唑可抑制青年蛋鸡骨骼发育。试验Ⅳ雌二醇对蛋鸡骨代谢生化指标的影响本试验研究了雌激素诱导蛋鸡髓质骨形成过程中血浆钙、磷、ALP、StrACP的变化。14周龄135羽公鸡,115羽母鸡预饲1周后,各随机采集10份血液样品并杀5羽采骨骼样品,然后将剩余的公、母鸡各随机平均分为两组,A组为公鸡对照组,B组为公鸡试验组、肌注17β-雌二醇2 mg/d；C组为母鸡对照组,D组为母鸡试验组、口服来曲唑0.5 mg/d,试验为期18 d。在试验开始时和试验过程中采集血液样品,进行血液生化和性激素水平测定。结果表明,A组雄激素水平随蛋鸡日龄增加而上升且极显著高于B组(P<0.01);C组雄激素水平基本恒定,在试验后期显著低于D组(P<0.05)。A组雌激素水平基本恒定,且显著低于B组(P<0.05)；B组雌激素浓度在试验初期明显上升,后又有所下降；C组雌激素水平随日龄增加而上升,且显著高于D组(P<0.05)；D组用药后,雌激素水平下降。各组血浆钙均有升高的趋势；A组血浆钙水平显著低于B、C组(P<0.05),A、D组比较差异不显著；B组血浆钙水平显著高于C、D组(P<0.05)；C组血浆钙显著高于D组(P<0.05)。B组血浆磷浓度显著高于其他三组,其余各组血浆磷水平差异不显著。各组StrACP均有上升趋势,各组差异不显著。各组ALP均有升高趋势,A组ALP活性低于B组,但差异不显著；到试验后期C组ALP活性显著高于D组(P<0.05)。结论：雌激素可以提高血浆钙、磷水平,增加StrACP和ALP活性,髓质骨形成时体内进行着旺盛的骨代谢。来曲唑有显著的雌激素抑制作用。试验Ⅴ雌二醇对体外鸡胚成骨细胞增殖及凋亡的影响本试验研究了不同浓度雌激素和来曲唑对体外鸡胚成骨细胞增殖的影响及雌激素对成骨细胞凋亡的影响。应用酶消化法获取15日龄鸡胚额骨成骨细胞,用不同浓度的雌激素和来曲唑处理10 h、24h后,通过MTT法测定细胞增殖率。将0 pg/mL、20 pg/mL雌激素培养基处理成骨细胞24 h后,经annexin V-FITC和PI染色后,用流式细胞仪检测细胞的凋亡和周期情况。结果表明,雌激素对成骨细胞增殖有一定的促进作用,20pg/mL时增殖作用最强；250 ng/mL来曲唑对成骨细胞有显著的促增殖作用。雌激素组成骨细胞凋亡率为0.17%,对照组为1.18%。结论：雌激素可促进成骨细胞增殖,并具有抗成骨细胞凋亡的作用。试验Ⅵ雌二醇对体外鸡胚成骨细胞ALP活性及其雌激素受体基因表达的影响本试验研究了不同浓度雌激素对体外培养鸡胚成骨细胞ALP活性的影响,并进一步研究雌激素对成骨细胞雌激素受体表达的作用,以探讨雌激素的作用机理。应用酶消化法获取15日龄鸡胚额骨成骨细胞,用不同浓度的雌激素和来曲唑处理24 h后,通过PNPP测定细胞ALP活性。将20 pg/mL雌激素和250 ng/mL来曲唑处理成骨细胞24 h,用RT-PCR的方法检测雌激素受体基因的相对表达情况,并用β-actin作为内参照予以矫正。结果显示,10pg/mL雌激素组碱性磷酸酶活性显著高于对照组,来曲唑对碱性磷酸酶活性没有明显影响。与对照组相比,雌激素可以诱导雌激素受体基因表达,来曲唑则抑制雌激素受体基因表达。结论：雌激素可诱导雌激素受体表达和增强成骨细胞ALP活性。