柑橘在我国水果产业中占据了十分重要的经济地位,然而其产量和品质受周期性冻害影响严重。因此,开展柑橘的抗寒育种研究十分重要。遗传转化是获得抗逆种质的途径之一。本研通过根癌农杆菌介导的方法将从枳(Poncirus trifoliata)中克隆的ERF109和ZFP1基因导入柠檬(Citruslimon),获得了转基因植株并初步进行抗性分析。取得的主要结果如下:1、转化和再生:ERF109基因累计转化柠檬上胚轴800个,获得再生芽体200个;ZFP1基因累计转化柠檬上胚轴600个,获得再生芽体300个。2、再生植株分子鉴定:对再生芽进行PCR阳性鉴定,共得到柠檬转ERF109阳性苗22株,柠檬转ZFP1阳性苗6株。采用半定量PCR和实时定量PCR对部分阳性苗进行目的基因表达量分析,结果表明在转基因阳性植株中,目的基因表达水平比野生型对照均有不同程度的提高。3、ERF109和ZFP1转基因植株抗寒性分析:分别对ERF109和ZFP1柠檬转基因株系和野生型植株进行低温处理,结果表明低温处理后野生型对照的叶片萎蔫更严重,电导率明显高于转基因株系。该结果初步证明了 ERF109和ZFP1转基因柠檬抗寒能力得到了增强。此外,ERF109和ZFP1转基因柠檬ROS含量低于野生型。研究表明,ERF109和ZFP1超表达增强了转基因植株的抗寒能力,维持较低水平的ROS可能是抗性增强的一个机制。