单一AOT微乳液与AOT/TritonX-100混合微乳液体系中假丝酵母脂肪酶催化蓖麻油水解的研究

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本论文用紫外-可见分光光度计,通过测定蓖麻油的水解产物-脂肪酸与铜离子形成的络合物在710 nm处的吸光度变化,研究了AOT/TritonX-100混合微乳液体系和单一的AOT微乳液体系中,TritonX-100占总表面活性剂的摩尔分数(x(%))、水与总体表面活性剂的摩尔比(ω0)、水相pH值、反应温度(T)、酶浓度([E]wp4-24mg·mL-1)、底物浓度([s]0.04-0.32mol·L-1)等因素对假丝酵母脂肪酶催化蓖麻油水解反应的影响。研究发现,保持总体表面活性剂浓度不变,向AOT微乳液体系中引入非离子型表面活性剂TritonX-100能够明显提高假丝酵母脂肪酶的酶活性,且在0≤x≤20%的范围内,酶活性随着x的增大而迅速增大。研究结果表明,单一AOT微乳液体系中,当反应温度为307.15-311.15K、水相pH=6.8、ω0=6-7时酶活力最高;而AOT/TritonX-100混合微乳液体系(x=20%)中,当反应温度为307.15K,水相pH=7.0,ω0=5-6时酶活力最高。应用Arrhenius方程求得了两个体系中该反应的活化能,根据米氏方程求得了表观米氏常数(Km,a),最大反应速率(vmax)以及酶的催化常数(Kcat)。发现向AOT微乳液体系中引入非离子型表面活性剂TritonX-100,并不改变反应活化能;但是在AOT/TritonX-100混合微乳液体系中vmax和Kcat均为单一AOT微乳液体系中的两倍,而Km则略有增大。并对酶在两种不同体系中的稳定性进行了讨论。
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