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猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2型引起的以猪的体质下降、腹泻、消瘦、呼吸困难为特征的一种传染病。猪是圆环病毒的主要宿主。猪对圆环病毒有较强的易感性,各种年龄的猪均可感染,可导致猪的免疫抑制。猪圆环病毒在全球范围内对生猪的养殖业造成了巨大的经济损失,快速、准确地诊断猪群的抗体水平对防治本病具有重要的意义。本研究将PCV2Cap蛋白的去核定位信号肽基因插入原核表达载体pET-32a中,经IPTG诱导表达,产生了具有免疫原性的融合蛋白。经过表达条件的优化,表达的蛋白仍以包涵体形式存在。经尿素变性、透析复性、Ni柱纯化后的蛋白作为免疫原,免疫6-8周龄的BALB/c小鼠,细胞融合、间接ELISA筛选、亚克隆后获得3E7、3C7、5A7、6D6等4株能够稳定分泌针对PCV2Cap蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞,其上清效价分别为1：1280、1：1280、1：2560和1：10240,腹水效价分别为1：12800、1：102400、1：12800和1：204800,其中3C7不仅与PCV2具有荧光反应,而且对本室构建的PCV1-2具有荧光反应性,其上清和腹水的荧光效价分别为1：80和1：3200,4株单抗亚类均为IgM。以表达并且纯化后的融合蛋白作为包被抗原,并根据4株单抗的特性,挑选出单抗3C7作为竞争一抗建立了检测PCV2抗体的竞争ELISA方法。经过血清稀释度、封闭液、竞争时间等条件的优化,最终建立了特异性好、灵敏度高的竞争ELISA方法,并利用该方法对猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征等病毒抗体进行检测,结果均无交叉反应。用该方法检测了猪血清189份,结果表明：该方法检测结果与商品化的PCV2ELISA抗体检测试剂盒符合率为93.7%,阳性和阴性符合率分别为94.9%和87.9%；与间接免疫荧光的符合率为85.2%,阳性和阴性符合率分别为87.4%和76.3%。我们建立的间接竞争ELISA方法具有简单、快速、灵敏度高等特点,可以被广泛用于PCV2血清抗体水平的检测。