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目的:通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法扩增人类白细胞抗原Ⅰ类分子中B抗原的识别基因,检测乳腺癌患者外周血淋巴细胞HLA-B基因的表达情况,探讨外周血淋巴细胞HLA-B mRNA表达与乳腺癌的分期及淋巴结转移关系,为检测乳腺癌的发生、发展、淋巴转移提供有价值的评估指标。方法:设计、筛选HLA-B的特异性引物,以管家基因葡萄糖-3-磷酸脱氢酶(glucose3-phosphate dehydrogenase, G3PDH)作为内参照,运用RT-PCR扩增HLA-B mRNA和G3PDH mRNA。收集35例乳腺癌患者(分为无淋巴结转移组、淋巴结转移组和Ⅰ-Ⅱ期组、Ⅲ-Ⅳ期组)和20例正常人、20例乳腺良性肿块患者的抗凝外周血,提取外周血淋巴细胞,用RT-PCR扩增HLA-B mRNA,其琼脂糖凝胶电泳结果采用凝胶分析软件Gel pro 4.0分析其积分光密度值(IOD),检测HLA-B mRNA的基因表达。结果:1.乳腺癌患者PBL HLA-B mRNA的表达明显低于正常对照组和良性对照组的PBL HLA-B mRNA的表达(P<0.01);2.正常对照组的PBL HLA-B mRNA的表达与良性对照组的PBL HLA-BmRNA的表达无显著差异(P>0.05);3.乳腺癌患者中无淋巴结转移组和淋巴结转移组的PBL HLA-B mRNA的表达相比,淋巴结转移组的表达低于无淋巴结转移组(P<0.05);4.乳腺癌患者中Ⅰ-Ⅱ期组和Ⅲ-Ⅳ期组的PBL HLA-B mRNA的表达相比,Ⅲ-Ⅳ期组的表达低于Ⅰ-Ⅱ期组(P<0.05),有统计学差异。结论:1.乳腺癌患者外周血淋巴细胞HLA-B mRNA表达的降低,尤其是淋巴结转移乳腺癌和Ⅲ-Ⅳ期组更为显著,导致抗原递呈能力缺陷,提示宿主HLA的状态与肿瘤的发生、发展和转移相关,可能是乳腺癌通过HLA途径逃逸机体免疫监视的重要表现。2. PBL HLA-B mRNA的表达水平能够反映乳腺癌进展的程度和淋巴转移的状况,对乳腺癌的早期辅助诊断、治疗和术后随访具有一定指导意义。