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背景与目的:课题组前期实验研究已经证明,复方调衡方对于荷瘤小鼠抗肿瘤治疗效果良好,但是调衡方治疗肿瘤是否与提高巨噬细胞(M?)免疫功能有关还不清楚。本实验探讨了调衡方多糖(THP)对于M?免疫功能影响的可能机制,从增强M?免疫功能方面研究抑瘤,完善调衡方治疗肿瘤多方位,多靶点理论,为复方多糖治疗肿瘤提供新思路。 方法:本次实验选用6到8周龄昆明小鼠,获取小鼠腹腔M?,进行体外培养,将纯化的M?,均匀接种到培养孔中,将各孔随机分成6组,每组10孔,培养24h后,加入各剂量THP稀释液以及贞芪多糖稀释液和细菌脂多糖(LPS)稀释液,培养48h后,进行THP对体外培养M?吞噬功能的影响:在光学显微镜下观察各组活的M?形态变化,以及通过M?吞噬墨汁实验、M?吞噬金黄色葡萄球菌实验和酸性磷酸酶(ACP)实验来检测M?的吞噬能力,通过Image-Pro PIu5.1软件分析,将ACP激活程度与吞噬墨汁程度换算成阳性面积数值,并在560nm处测定M?吞噬金黄色葡萄球菌分光光度值(A);THP对体外培养M?上清液中白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响:用酶联免疫吸附法(ELISA)测定个孔上清中IL-1、IL-6、TNF-α三项指标,使用酶标仪在450nm处测定OD值。 结果:THP对小鼠腹腔M?进行体外培养干预后,与正常模型组比较,THP大、中剂量组中:M?体积显著增大,细胞多呈圆形和椭圆形;吞噬墨汁的颗粒数显著增多,换算成阳性面积以后,THP大中剂量组与空白对照组比较阳性面积升高程度显著,有统计学意义;对金黄色葡萄球菌菌悬液的廓清能力显著增强,经吸光光度值测定,THP大中剂量组与空白对照组比较廓清程度显著,具有统计学意义;ACP棕褐色染色显著增多,提示的M?胞内活性显著增强,换算成阳性面积以后,THP大中剂量组面积升高程度显著,有统计学意义。加药后的M?上清液中细胞因子的测定,THP大、中剂量组与正常对照组比较,THP大、中剂量组上清液中三种细胞因子含量显著升高,有统计学意义。 结论:不同剂量的THP稀释液对于小鼠腹腔M?的免疫功能有增强作用,其增强程度与THP浓度呈正相关;THP可以通过增强M?的吞噬能力以及提升M?内ACP的活性,提高M?的吞噬免疫功能; THP可以通过增强M?分泌细胞因子(IL-1、IL-6、TNF-α),促进M?的免疫功能。