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成纤维细胞生长因子1（FGF-1）是成纤维细胞生长因子家族成员之一。文献报道，FGF1在多种肿瘤细胞中高表达，如胰腺癌、乳腺癌、肝细胞癌、胶质瘤，已有结果证明，它也许是导致肿瘤预后较差的因子之一。越来越多的证据证明，FGF-1在肿瘤的发生及转移中起到了比较重要的作用，可能成为肿瘤治疗中的一个靶点。本实验中，我们选择了几株恶性程度不同的乳腺癌细胞系，并通过免疫荧光及RT-PCR的方法检测了内源性FGF-1的表达，发现在恶性程度较高的MDA-MB-231细胞及BT549细胞中FGF-1的表达量较高，而恶性程度较低的MCF-7及BT474中FGF-1的表达量较低。目前治疗肿瘤的主要手段有放疗、化疗、手术治疗、内分泌治疗及分子靶向治疗等，传统的放疗化疗等手段在治疗肿瘤的过程中，往往对人体的正常组织伤害也比较大，所以寻找有效的特异性较好的分子靶向药物成为几年来研究的一个热点话题，而抗体作为一种天然的产物，用于肿瘤的治疗成为一个方向。本实验室的前期实验基础，选择FGF-1作为靶点，设计了特异性识别FGF-1的单链抗体。体内实验证明过表达scFv1C9的乳腺癌MCF-7细胞的成瘤率与对照组相比明显降低，肿瘤的增长速度也受到了一定的抑制。体外实验证明，在过表达scFv1C9的细胞内，scFv1C9能够与FGF-1特异性的结合，阻止FGF-1入核，从而阻断了FGF-1的作用，进一步抑制细胞的增殖。本实验在体外对MCF-7细胞进行瞬时转染，过表达scFv1C9后，通过流式细胞仪检测细胞周期的分布情况，并以细胞周期抑制剂作为阳性对照，发现scFv1C9能够引起明显的G0/G1期阻滞现象。在单链抗体的基础上，本实验还构建了抗FGF-1的人鼠嵌合抗体，在分别含有轻链及重链的恒定区表达载体pFUSE2ss-CLIg-hk、pFUSEss-CHIg-hG1，轻链及重链的可变区分别克隆到这两个载体上，并共转到哺乳动物细胞293T细胞内，通过免疫荧光的方式检测到重组重链载体的表达，为进一步获得人-鼠嵌合抗体奠定了基础。