在免疫组化方法上,以往多为ABC法、PAP法、免疫胶体金法等.近年来建立的标记链菌素——生物素法(即labelled streptavidin biotin,LSAB法)具有灵敏度高,背景着色浅的优点,为脑干损伤的免疫组化研究提供了新的方法.从理论上来说,外伤伤及延脑生命中枢其物质基础是神经元、轴索的改变,也可伴有胶质细胞及血管的改变,因此,通过测定和观察神经元、轴索、胶质细胞的某些特殊反应物有可能显示其损伤改变.免疫组化染色结果除进行普通光镜观察外,还进行激光显微镜检查.该研究首次应用免疫组化技术来研究脑干损伤的改变,应用新的免疫组化方法检测多种指标,发现脑干损伤时神经元胞浆中出现血浆蛋白(白蛋白、纤维蛋白原及纤维连接蛋白)免疫组化阳性反应,从而提供了神经元受损的证据;该研究首次应用激光显微镜对脑干神经轴突损伤进行三维观察,证实脑干损伤时,其神经轴突发生了断裂、空泡样变等改变;该研究首次应用NF单克隆抗体的免疫组化反应来检测神经轴突的改变,并应用图像分析技术测量轴突直径,从定量上证实脑干损伤时神经轴突明显肿胀,为诊断脑干损伤提供了客观的依据.