血竭为传统名贵中药,始载于《唐·新修本草》,为中医常用的活血散瘀和止血定痛药。目前实际应用的血竭按来源不同分为进口血竭和国产血竭两类。龙血竭为国产血竭,本品虽然为我国新近研究开发的一类中药新药,但至今存在药理活性成分不明,作用机制不清,质量标准不完善等问题。本文重点针对龙血竭止血、活血双向调节作用的药理活性物质基础展开研究。以凝血和血栓抑制实验的药效学指标为引导,对本品中化学成分进行活性筛选,从制得的止血与活血药理活性较强的氯仿和正丁醇部位中分离得到龙血素A、龙血素 B、7,4′-二羟基黄酮、tilianin 和 agastachoside 等 5 个单体化合物。进一步采用血小板聚集实验、体外培养人脐静脉内皮细胞实验等对所得的化合物进行了止血、活血药理活性研究。结果证明:本品正丁醇提取部位的止血、活血作用显著;五个单体成分体外对血小板聚集率均有影响,对脐静脉上皮细胞的氧化损伤均有明显保护作用,其中 7,4′-二羟基黄酮、Agastachoside 等的活性最强。本文运用紫外光谱法、近红外漫反射光谱法结合可视化褶合变换技术对不同来源的血竭样品进行了定性分析,建立的分析方法具有快速、准确的鉴别意义;用正相高效液相色谱法建立了同时测定龙血竭中龙血素 A 和龙血素 B 的定量分析方法,较好地解决了本品现行质量标准规定的含量测定方法的干扰问题;以获得的五个单体化合物为对照品,用薄层色谱法结合数字图像处理技术,对本品进行了分析研究。结果显示,该法分离度较好,数据处理方法科学合理,作为本品的质量控制与评价,尤其是快速质检有重要价值。上述研究内容和获得的结果均为本文首次进行的探索性研究工作,尚未见文献报道。这些研究结果为珍贵药材血竭的鉴别和质量评价提供了可靠的科学方法,为龙血竭国家药品标准的修订提供了客观数据和资料。初步阐明了龙血竭止血与活血功效的双向调节作用的物质基础和作用机制,提示本品作为心脑血管病防治药物,特别是脑卒中溶栓治疗中再出血的棘手难题的用药,具有潜在优势,值得深入研究。有关这方面的工作,我们尚在继续进行中。 1