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本研究以养猪场圈舍面源恶臭污染治理为对象,从微生物协同转化及产香抑臭两方面开展除臭功能菌的筛选,按照其功能及微生物之间的协同作用进行组合,研制高效除臭菌剂。 对实验室已有菌株进行整理,并从畜禽养殖场、堆肥场、河流等场所进行筛选,获得20株具有高效除臭作用的微生物,其中酵母菌1株、芽孢杆菌13株、霉菌4株、乳酸菌1株、光合菌1株。本研究从酒曲中分离得到17株产香菌,其中酵母菌7株、霉菌5株、芽孢杆菌5株。 模拟养猪场圈舍面源恶臭污染,以微生物协同作用为理论,进行初步复配组合除臭研究,并综合考虑添加木屑、供氧、菌液浓度等因素,得到C组除臭菌剂(添加酵母菌、芽孢杆菌、霉菌、乳酸菌和光合菌)和D组除臭菌剂(添加全部功能菌)在好氧和厌氧条件下对猪粪中恶臭的去除均有明显的效果,而添加木屑对猪粪中恶臭的去除则没有明显的效果。 采用正交试验进一步对C组菌剂中6种功能菌的比例进行优化,以第5天时的综合恶臭浓度为考察指标,得出复合除臭菌剂中酵母菌Y-1、霉菌M-1、乳酸菌L-1、芽孢杆菌B-1、芽孢杆菌B-2和光合菌P-1的最适比例为1∶1∶1∶1∶3∶3。在此情况下,除臭复合菌剂对综合恶臭、TVOC(总有机物)、NH3和H2S的平均去除率分别为54.97%、18.66%、13.12%、41.18%,对综合恶臭、TVOC、NH3和H2S的最大去除率分别为72.95%、35.26%、20.20%、81.28%。此外,将酿酒产香菌与复合菌剂进一步复配,添加酿酒酵母、酵母+霉菌、酵母+霉菌+芽孢的组合菌对综合恶臭的去除均有明显效果,其最大去除率分别为78.94%、85.15%、84.81%。 通过16S rDNA、18S rDNA和26S rDNA D1/D2区序列同源性分析,复合除臭菌剂中的6种微生物分别为罗伦隐球酵母菌(Cryptococcus laurentii)、Bacillussafensis、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、卷枝毛霉(Mucor circinelloides)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)和沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonaspalustris),鉴定结果表明,复合菌剂中有酵母菌、芽孢杆菌、霉菌、乳酸菌及光合菌,这些功能菌属于当前生物除臭复合菌剂中的主流菌群。 采用鱼类和小鼠作为安全性试验动物,经过10天的观察,未见鱼类与小鼠死亡,体重也逐渐增加,与对照组相比,无明显差别。安全性试验表明,其安全无毒,可以可靠应用于畜禽养殖业的除臭。