目的 周围神经损伤是常见的骨科疾病,多发生于暴力冲突,无论在战时和平时都较常见。根据第二次世界大战的战伤统计,周围神经损伤占外伤总数的10%,火器伤骨折中,约60%合并神经损伤。周围神经损伤多发生于尺神经、正中神经、桡神经、坐骨神经和腓总神经。如果治疗不当,将严重影响患者的四肢活动。现在主要治疗方法是神经缝合术,然而神经的功能恢复不令人满意。随着近年来,组织工程学的发展,雪旺氏细胞(Schwann cells,SCs)可以与生物材料复合修复周围神经缺损是一种被广泛应用的实验手段。雪旺氏细胞是外周神经的主要结构和功能细胞,并且在周围神经的再生修复中起重要作用。但由于取材和体外培养的困难,也限制了其的应用。 骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)分离、培养的成功,以及多向分化潜能的发现和向神经基质细胞分化的成功,为修复周围神经损伤提供了一种新的组织工程学种子细胞来源。基于此,本实验从日本大耳白兔骨髓间充质干细胞的分离、纯化及扩增以及在体内向雪旺氏细胞分化的可能性进而促进兔坐骨神经损伤的修复等方面出发进行了初步探索,为骨髓间充质干细胞修复周围神经损伤的临床应用提供实验依据。 方法 骨髓间充质干细胞原代分离培养、鉴定以及传代后注入坐骨神经损伤的兔模型中,以期其在体内自身诱导。具体方法:在无菌条件下取2月龄日本大耳白幼兔股骨的骨髓细胞做原代培养。根据骨髓间充质干细胞与其他细胞的密度不同而采用Percoll(比重1.077)分离液将其分离,此方法分离的间充质干细胞种类较为单一,根据细胞贴壁性能不同,筛选易贴壁但贴壁