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目的： 探讨抑制TLS通路REV1基因和FA通路与TLS通路上游RAD18基因后人肺腺癌耐药细胞株（A549/DDP）对顺铂（DDP）敏感性的变化及其相关的作用机制。 方法： 应用Western blotting测定不同浓度DDP处理后的人肺腺癌细胞株（A549）和A549/DDP细胞RAD18和REV1蛋白表达。采用脂质体转染试剂分别将靶向RAD18 和 REV1 基因的 siRNAs (RAD18-siRNA 和 REV1-siRNA) 转染于A549/DDP细胞，Western blotting测定转染前后RAD18和REV1蛋白表达水平以检测转染效果。然后检测 RAD18 基因沉默后，经不同浓度梯度 DDP 诱导的A549/DDP 细胞 FANCD2 蛋白单泛素化水平（FANCD2 的长短片段之比，即FANCD2-L/S比值）和PCNA蛋白单泛素化水平。应用CCK-8法测定分别单独和共转染RAD18-siRNA和REV1-siRNA前后经不同浓度DDP处理24h和48h的A549/DDP细胞增殖率变化。流式细胞术测定单独和共转染RAD18-siRNA和REV1-siRNA前后A549/DDP细胞经DDP（10μg/mL）处理48h的凋亡率和细胞周期变化。 结果： （1）A549/DDP细胞与A549细胞经不同浓度DDP处理后，除在DDP浓度为0μg/mL时，A549/DDP细胞RAD18蛋白表达水平与A549细胞无明显差异（t=1.739，P=0.097），在其他的DDP浓度点RAD18蛋白表达量均明显高于A549细胞组(P <0.05)，同样各DDP浓度点诱导A549/DDP细胞的REV1蛋白表达水平亦较 A549 细胞的明显增高（P 均<0.05），提示 A549/DDP 细胞 RAD18 和REV1高表达与DDP耐药性相关。（2）A549/DDP细胞分别转染RAD18-siRNA和REV1-siRNA后，RAD18和REV1蛋白表达较转染前明显降低(P<0.05)，表明转染成功，两个基因沉默有效?（3）A549/DDP细胞转染RAD18-siRNA后经不同浓度DDP处理的FANCD2和PCNA蛋白的单泛素化水平较转染前明显下降(P<0.05)，提示DDP诱导的FA和TLS通路激活受到抑制，证实RAD18基因位于FA通路上游并同时参与FA通路和TLS通路的激活。（4）CCK-8法测定细胞增殖率的结果显示：A549/DDP 细胞分别单独或共转染 RAD18-siRNA 和REV1-siRNA后，经不同浓度DDP处理24h和48h的半数抑制浓度（IC50）均明显低于转染前(P均<0.05)，表明DDP对A549/DDP细胞的毒性作用增强。同时， RAD18-siRNA和REV1-siRNA共转染后DDP对A549/DDP细胞的增殖抑制作用较单转染更为显著(P均<0.05)，提示共转染RAD18-siRNA和REV1-siRNA后进一步增强了DDP对A549/DDP细胞的毒性。（5）A549/DDP细胞分别单独或共转染RAD18-siRNA和REV1-siRNA前后经10μg/mL浓度DDP处理48h，流式细胞术检测显示，转染组较未转染组，DDP 诱导的细胞凋亡率明显增加(P 均<0.05)，共转染组较单转染组细胞凋亡率增加更为明显(P 均<0.05)，这与细胞增殖率测定结果相吻合。细胞周期实验显示这两个 siRNA 转染后 DDP 处理的A549/DDP细胞停滞在G2期的比例较转染前明显增加(P均<0.05)，且共转染组较两个单转染组细胞的G2期阻滞效应更为显著(P均<0.05)，提示RAD18和REV1基因沉默阻止了A549/DDP细胞的细胞周期进展，继而延缓DNA复制。 结论： A549/DDP细胞FA通路与TLS通路上游的RAD18基因和TLS通路的REV1基因表达增高与其对DDP耐药相关，分别沉默RAD18和REV1基因后可通过抑制 FA 通路与 TLS 通路的 DNA 损伤修复功能，由此增强 A549/DDP 细胞对DDP的敏感性，同时共沉默REV1和RAD18基因使这一增敏效应进一步增加，表明RAD18和REV1基因共沉默可逆转A549/DDP细胞对DDP耐药性。