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乙烯是一种重要的植物激素,参与植物整个生理过程。ACC合成酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid synthase,ACS)和ACC氧化酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylicacid oxidase,ACO)是植物乙烯合成过程中的重要酶,对乙烯的合成具有重要的调控作用,所以这两个基因的研究具有理论与实际意义。在茶树新梢cDNA文库测序所获得的EST基础上,利用RACE(Rapid Amplification cDNA Ends)、RT-PCR等技术,克隆得到编码这两个酶的全长基因序列,在NCBI上分别登录为EF205149、DQ904328。其中ACS长1579bp,编码478个氨基酸,预测分子量约为53.7KD,等电点8.039;ACO长1237bp,编码320个氨基酸残基,预测分子量为36.2KD,等电点5.41。以Neighbor-Joining法构建进化树,发现ACS及ACO都与柿树中的同类基因同源性最高,亲缘关系最近。这两个基因的获得为以后进一步研究其在茶树抗逆中的作用打下一定的基础。根据所得到的茶树ACS及ACO基因序列设计引物,利用B-actin作为阳性对照,取安吉白茶、6/8、杭州大叶、龙井长叶、薮北、龙井43和福鼎大白茶7个品种在经历高温和低温,以及龙井43在冬天不同时期样品逆转录的cDNA进行RT-PCR分析,结果发现ACS及ACO基因的表达量与品种的抗逆性强弱有一定程度的相关性;在不同时期龙井43样品中,ACS及ACO基因的表达也有类似的结果。亲环素广泛存在于多种生物体内,在植物的发育和新陈代谢等生理过程中具有重要作用。通过对茶树新梢cDNA文库大量随机测序,获得了一个编码亲环素的全长基因,在GenBank登录,登录号为DQ904327。茶树亲环素基因cDNA全长949bp,其中开放阅读框全长495bp,编码蛋白质含有164个氨基酸,分子量约为17.47kD,等电点约为8.54,它具备5’端非编码区的“CAAT”标志及3’端非编码区的”AATAAA”poly-A加尾信号。其推测的氨基酸序列经与26条其他生物亲环素蛋白氨基酸序列进行CLUSTAL W多序列联配并以Neighbor-Joining法进行进化树构建后,发现与水稻和小麦的相似性较高,达到85%以上。根据亲环素基因开放阅读框序列设计引物,构建了原核表达载体pET/Csin-Cyp,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功诱导出了一个分子量为23kD的亲环素融合蛋白。这将便于后期在基因以及蛋白质水平上进一步研究亲环素蛋白在茶树生理和调控机制中发挥的作用。