论文部分内容阅读
放线菌是医药和农用抗生素的重要产生菌,其次生代谢产物具有结构新颖、生物活性独特的特点,从放线菌中发现新颖活性先导化合物的研究具有重要意义。本论文通过TLC及抑菌活性筛选,从20株放线菌菌株中筛选出代谢产物化学成分丰富,且对三七根腐病原真菌有较好拮抗活性的3株放线菌进行后续次生代谢产物研究。通过16S rRNA基因序列分析,3株放线菌分别归属为Streptomyces diastaticus subsp.Ardesiacus、Streptomyces yatensis 和 Streptomyces ardus。采用硅胶、凝胶柱层析以及高压液相色谱分离技术,从菌株YIMPH20095的发酵液中分离纯化得到12个化合物,通过波谱数据确定它们的结构分别为:izumiphenazine B(CX-1),phenacein(CX-2),strepphenazine A(CX-3),strepphenazine B(CX-4),strepphenazine C(CX-5),1-hydroxyphenazine(CX-6),9-hydroxy-l-phenazinecarboxylic acid(CX-7),phenazinecarboxylic acid(CX-8),strepphenazine D(CX-9),6-(methoxycarbonyl)phenazine-2-carboxylic acid(CX-10),6-hydroxy-1-phenahecarboxylic acid(CX-11)和 strepphenazine E(CX-12)。其中化合物strepphenazine A-E是尚未有文献报道的5个新结构化合物,由于它们源自链霉菌菌株,因此暂将它们命名为strepphenazine A-E。从菌株YIM PH20103的发酵液中分离纯化得到10个化合物,通过波谱数据确定它们的结构分别为:4-tetralol-1-one(CX-13),coumarin(CX-14),cyclo-(glycyl-try)(CX-15),cyclo-(trp-tyr)(CX-16),cyclo-(L-phe-L-pro)(CX-17),cyclo-(D-phe-L-pro)(CX-18),3-benzyl-6-ethylpiperazine-2,5-dione(CX-19),cyclo-(phe-val)(CX-20),indole-3-acetic acid(CX-21)和 cyclo-(pro-trp)(CX-22)。从菌株YIM 121489的发酵液中分离纯化得到7个化合物,通过波谱数据确定它们的结构分别为:isomigrastatin(CX-23),4-((E)-7-((6E,10E)-4-hydroxy-3-methyl-12-oxooxacyclododeca-6,10-dien-2-yl)-5-methyl-4-oxooct-6-en-1-yl)-piperidine-2,6-dione(CX-24),9(E)-18-((E)-1-hydroxy-3-phenylallyl)-10-methyl-12-methylene-2,8-dioxo-1-oxa-7-azacyclooctadec-15-en-14-yl acetate(CX-25),4-(7-((3 Z,8E,12E)-6,7-dihydroxy-3-methyl-14-oxooxacyclotetradeca-3,8,12-trien-2-yl)-4-oxoheptyl)piperidine-2,6-dione(CX-26),adenosine(CX-27),cinnamic acid(CX-28)和 lH-pyrrole-2-carboxamide(CX-29)。采用4株三七根腐病原真菌及3株常见病原细菌对以上单体化合物进行了抑菌活性测定,结果表明:新化合物strepphenazine A对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和人参链格孢均有明显的抑菌活性,其MIC值分别为16、32和32 μg/mL;strepphenazine B对尖孢镰刀菌、黄瓜萎蔫病菌及人参链格孢等有抑制活性,其MIC值均为64 μg/mL;strepphenazine C对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌有强的抑菌活性,其MIC值分别为8和16 μg/mL,对尖孢镰刀菌、黄瓜萎蔫病菌及人参链格孢也有明显的抑制活性,其MIC值均为32 μg/mL;strepphenazine D对人参链格孢、黄瓜萎蔫病菌及金黄色葡萄球菌等均有明显的抑菌活性,其MIC值分别为16、32和32 μg/mL;strepphenazine E对人参链格孢和金黄色葡萄球菌有抑菌活性,其MIC值均为32μg/mL。此外,24个已知化合物对测试病原菌均有不同程度的抑制活性,其MIC值范围为8-512 μg/mL。