【摘 要】
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骨组织工程是目前临床治疗骨缺损最有前途的方法之一,理想的组织工程骨应具有来源广泛,可塑性强,体内相容性好和成骨能力强的特点。随着纳米技术的发展,不断有新的纳米材料应用于
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骨组织工程是目前临床治疗骨缺损最有前途的方法之一,理想的组织工程骨应具有来源广泛,可塑性强,体内相容性好和成骨能力强的特点。随着纳米技术的发展,不断有新的纳米材料应用于组织工程,但对这些纳米材料的生物学效应尚无足够的报道。而组织工程细胞来源有限是另一个重要的限制性因素。本实验旨在研究新型的纳米材料对成骨细胞的影响以及胚胎干细胞成骨分化的规律。论文第一部分研究新型的20nm粒径的羟基磷灰石(nHAP)对成骨前体细胞MC3T3-E1的生物学效应。采用纳米羟基磷灰石颗粒悬液直接作用于成骨前体MC3T3-E1细胞。运用四唑盐比色法(MTT)、碱性磷酸酶(ALP)的方法分析nHAP悬液对成骨前体细胞增殖和分化影响。探讨了钙离子溶出的培养液和条件培养液吸附的nHAP对细胞增殖、分化的影响。结果显示:nHAP颗粒对成骨前体细胞的增殖有抑制作用但可以促进细胞的碱性磷酸酶活性以及后期的矿化,而钙离子溶出组和条件培养液吸附组并不存在明显影响。论文第二部分研究了胚胎干细胞(ESCs)成骨分化。胚胎干细胞具有增殖潜能,将其来源的成骨细胞做为组织工程供体细胞具有很好的应用前景。本实验采用小鼠胚胎干细胞,通过单层法诱导,分化初期用维甲酸处理,随后采用成骨诱导剂(维生素C、β—磷酸甘油、地塞米松)诱导。运用RT-PCR和茜素红染色的方法进行鉴定。结果显示该方法提高了后期矿化结节的产量,其中,维甲酸诱导了间质细胞的产生。本实验以单层法诱导,结合维甲酸处理诱导胚胎干细胞向成骨分化,为骨组织工程种子细胞的获得提供了一条新的途径。
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