【摘 要】
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目前人们已将NGF应用于AD和帕金森氏病的临床治疗,但是目前的疗效并不是太好,这与给药途径有很大关系.因此研究用基因导入方法使NGF作用于靶部位,或许是提高疗效的途径之一.
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目前人们已将NGF应用于AD和帕金森氏病的临床治疗,但是目前的疗效并不是太好,这与给药途径有很大关系.因此研究用基因导入方法使NGF作用于靶部位,或许是提高疗效的途径之一.为此,首先需了解NGF基因导入真核细胞后的表达情况和表达产物是滞具有特性,该实验克隆了βNGFcDNA,用真核细胞进行表达,并鉴定表达产物的活性,为以后的基因治疗打下基础.结论:应用RT-PCR方法,扩增出βNGFcDNA,经Sanger双脱氧末端终止法测定核苷酸序列正确后,用E.coliJM109将βNGFcDNA进行亚克隆,并用限制性内切酶图谱进行分析,证实βNGFcDNA克隆成功.应用真核细胞COS-7对βNGFcDNA进行一过性表达,经Westernblot分析,证实βNGFcDNA被正确表达.表达的βNGF蛋白的生物活性,由鸡胚背根神经凶的生长检测,证明具有良好的生物活性.β
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