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目前，农林业广泛使用的有机磷和氨基甲酸酯类农药对环境和生物危害很大。为了控制食品和环境中这两类农药的污染程度，减少危害，我国对有机磷农药和氨基甲酸酯类农药的使用范围和在农作物上的允许残留量作了严格限定。然而，仅仅是建立标准还不足以有效控制这两类农药的污染水平，重要的是要对这两类农药的残留量进行快速灵敏的检测。这就需要我们建立一套能够快速检测这两类农药的方法。近年来，人们更多地把注意力集中到研制具有高选择性、高灵敏度、较好的稳定性、低成本的乙酰胆碱酯酶(acerylcholinesterase，AChE(EC3．1．1．7))传感器上。就乙酰胆碱酯酶传感器而言，能够获得高灵敏度的乙酰胆碱酯酶是关键。因此，为了灵敏地检测微量有机磷和氨基甲酸酯类农药，有必要对不同生物来源的AChE进行筛选，并将敏感的酶源进行纯化。
本文以14种动物材料：鸡血、鸡肝、鸭血、鸭肝、鹧鸪肝、猪脑、猪血、猪肝、猫脑、猫血、猫肝、兔血、兔肝、狗肝为实验酶源，比较了AChE的基础酶活性，测得基础酶活在0．002521一O．1820[tmol~min-1．mg-1之问，猫脑的基础酶活性最高，猪血的活性最低。采用抑制中浓度(IC50)和双分子速率常数(Ki)测定AChE对甲胺磷和呋喃丹的灵敏度，对甲胺磷，由ICso所得到的AChE敏感性为：鸡血>猫脑>兔肝>鸡肝>猪脑>鹧鸪肝>鸭血>兔血>猪血>狗肝>猪肝>猫血>猫肝>鸭肝；由Ki所得到的AChE敏感性为：鸡血>猫脑>兔肝>鸡肝>猪脑>鹧鸪肝>鸭血>兔13I>猪111>狗肝>猪肝>猫血>猫肝>鸭肝。对呋喃丹，由IC50所得到的AChE敏感性为：猪脑>兔III>猫脑>兔肝>猪血>猫血>鸭血>猫肝>狗肝>猪肝>鸡血>鸡肝>鹧鸪肝>鸭肝；由Ki所得到的AChE敏感性为：猪脑>兔血>猫脑>兔肝>猪lflt>猫血>鸭血>猫肝>狗肝>猪肝>鸡血>鸡肝>鹧鸪肝>鸭肝。两种评定方法所得14种酶源对这两类农药的敏感性结果是一致的。另外，14种材料中的AChE活力的抑制作用与这两类农药的浓度有良好的线性关系，相关系数都在0．90以上。猪脑的AChE对这两类农药的敏感性都较好，因此决定将猪脑AChE进一步纯化。
采用硫酸铵沉淀-DEAEFF-QFF和硫酸铵沉淀-DEAEFF-普鲁卡因胺亲和层析两种不同的方法对猪脑AChE进行纯化，经比较硫酸铵沉淀-DEAEFF-普鲁卡因胺亲和层析效果好，能得到单一条带。纯化后猪脑AChE经SDS-PAGE呈一条带，表明其纯度达到电泳纯。纯化的猪脑AChE的分子量为67kD。将纯化的酶进行过量底物抑制效应检验，结果证实过量的ATCH对该纯化酶存在底物抑制效应，进一步证实该酶为AChE，其最大比活力为30．5410pm01．min1．mg-I，最佳pH为8．4，最适温度为41．7℃。纯化酶的抑制中浓度(ICso)测定表明，在抑制15min时，甲胺磷和呋喃丹对纯化猪脑的ICso分别为9．3243mg．L-I和0．06582mg．L-I。纯化后的猪脑对甲胺磷和呋喃丹均较为敏感，且对这两类农药有显著的线性响应。这项研究对以后将酶固定化并用于检测果蔬和环境中甲胺磷和呋喃丹残留量以及进行其分子方面的研究打下了良好的基础。