论文部分内容阅读
由葡萄单轴霜霉[Plasmopara viticola(Berk dt Curtis)Berl.Et de Toni]引起的葡萄霜霉病(Grape downy mildew)是葡萄种植业中危害最严重的病害之一;葡萄霜霉病是流行性病害,严重时可对葡萄产业造成毁灭性影响。目前,田间采用抗性品种、栽培技术、生物防治以及化学防治等手段来防治葡萄霜霉病,其中化学防治为最重要的防治手段,而羧酸酰胺类杀菌剂和甲氧基丙烯酸酯类是最近几年我国使用最广泛的杀菌剂。化学药剂的频繁使用可能导致葡萄霜霉菌逐渐产生抗药性,检测和了解葡萄霜霉病菌株抗性频率是指导田间化学药剂科学使用的依据。本研究建立了检测羧酸酰胺类杀菌剂和甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂抗性的分子方法—Taqman-MGB技术,并应用该方法对辽宁省、山西省、云南省、河北省、湖北省、山东省及湖南省7个省行政区的重要葡萄产区的葡萄霜霉菌进行了烯酰吗啉和嘧菌酯的抗性频率检测,为该地区烯酰吗啉和嘧菌酯的使用提供科学依据。主要研究结果如下:1.葡萄霜霉菌对烯酰吗啉和嘧菌酯抗药性分子检测方法(Taqman-MGB)的建立根据葡萄霜霉病菌对烯酰吗啉抗性的基因突变位点(纤维素合酶3基因1105位密码子)及葡萄霜霉菌对嘧菌酯抗性的基因突变位点(细胞色素氧化酶b基因的143位点),开发了Taqman-MGB抗药性检测技术。使用该技术,可检测出DNA含量为0.00126 ng的样本。相较于Tetra-primers ARMS PCR检测技术,该方法特异性强、假阳性低。2.2016年中国主要葡萄产区霜霉菌对烯酰吗啉的抗性频率检测利用研发的霜霉菌对烯酰吗啉抗性Taqman-MGB检测技术,对来自辽宁省北镇市、山西省清徐县、河北省威县、山东省蓬莱市、湖北省公安县、湖南省怀化市、云南省宾川县、云南省永仁县八个我国主要葡萄生产区域采集2127个葡萄霜霉病标本进行了检测,结果显示,抗性菌株有1087株,敏感菌株共1040株,总抗性频率为51.1﹪,其中,北镇、蓬莱、威县的葡萄霜霉菌对烯酰吗啉的抗性频率较高,高于80﹪,而清徐、宾川、怀化的菌株对烯酰吗啉的抗性频率较低,低于20﹪。3.2016年中国主要葡萄产区葡萄霜霉菌对嘧菌酯抗性频率检测利用研发霜霉菌对嘧菌酯抗性的Taqman-MGB检测技术,对来自辽宁省北镇市、山西省清徐县、河北省威县、山东省蓬莱市、湖北省公安县、湖南省怀化市、云南省宾川县、云南省永仁县八个我国主要葡萄生产区域采集2373个葡萄霜霉菌标本进行了检测,结果显示,抗性菌株共1567株,敏感菌株806株,总抗性频率为66﹪,其中,威县、永仁县、宾川县、怀化市、北镇市的葡萄霜霉病菌株对嘧菌酯的抗性频率较高,均高于80﹪,而清徐县、蓬莱市的菌株对嘧菌酯的抗性频率较低,低于10﹪。4.根据检测结果提出了建议根据葡萄霜霉菌对烯酰吗啉和嘧菌酯抗性频率检测结果,给出了各标本采集区域的烯酰吗啉和嘧菌酯使用建议。