纤细裸藻（Euglena gracilis）,属于原生动物门（裸藻纲,裸藻属）,是一种单细胞真核生物,无细胞壁。国家卫计委将其列为新资源食品,其产生的β-1,3葡聚糖具有抗肿瘤、免疫调节、降尿酸、等方面功能。因此研究其工业化生产和代谢机制以及遗传转化具有重要意义。本研究优化白化株E.gracilis在异养条件下的培养条件,使E.gracilis白化株生物量和β-1,3葡聚糖含量得到大幅提升,并研究了在发酵的不同时期时野生型和白化型E.gracilis胞内小分子代谢物的组成和变化,最后建立野生型E.gracilis核基因转化的方法。主要结果如下:以白化株E.gracilis细胞数、细胞生物量（干重）和β-1,3葡聚糖含量为指标进行了单因素试验、PB试验和响应面试验。单因素试验表明在分别以10 g/L葡萄糖、20 g/L的果糖、10 g/L的玉米浆、5 g/L的蛋白胨、2 g/L酵母粉为唯一碳氮源时细胞生长较好,硝酸钠在不同浓度都表现出了抑制白化株E.gracilis生长的作用。通过设计PB试验进一步确定各营养物质对E.gracilis白化株生长影响的显著性,结果表明蛋白胨＞葡萄糖＞酵母粉＞果糖＞玉米浆,其中蛋白胨、葡萄糖、酵母粉、果糖对白化株E.gracilis生长具有显著影响。根据具有显著性影响的4种营养物质设计了响应面实验,建立了模拟方程,确定了复合培养基的最佳配比。结果表明:pH值为3.0时葡萄糖、果糖、蛋白胨、酵母粉浓度分别为8 g/L、20 g/L、5 g/L、3.5 g/L,培养4 d时细胞浓度最高,细胞数能达到1×10~7cells/mL,细胞干重能达到10 g/L。5 L罐中在第2 d进行补料至初始培养基的物质浓度获得了更高的细胞数1.5×10~7 cells/mL,细胞干重达到15 g/L,副淀粉含量达到10 g/L。运用GC-MS对野生型和白化型藻株在其不同发酵时期（延滞期、指数期、稳定期）的热稳定与挥发的胞内小分子代谢物的检测,野生型共检测出2100个组分在过滤完匹配因子70以下组分共辨认出了114种物质,白化型共检测出2191个组分在过滤完匹配因子70以下的组分共辨认出了95种物质,运用PCA和PLS得分图和载荷图进行数据分析,二者在三个时期主要变化的物质为醇类、酯类、糖类、氨基酸类和有机酸类,如D-山梨糖醇,肉豆蔻酸肉豆蔻酯,乳糖,L-丙氨酸,十四酸等。通过VIP图对野生型和白化型藻株各个生长时期代谢物两两对比得到差异代谢物并进行t检验,得出不同时期差异较大的代谢物。使用农杆菌侵染法将pCambia 1300质粒导入野生型E.gracilis基因组,通过使用荧光显微镜观察发现在转化子中并没有观察到绿色荧光的存在。构建的ClP1-1300-KsdD质粒也成功导入野生型E.gracilis。但KsdD基因是否表达正在进行进一步验证。