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目的: 慢加急性肝功能衰竭(ACLF)，是在慢性肝病基础上出现的一种急性肝功能恶化的疾病，临床表现为黄疸、凝血功能障碍、腹水以及肝性脑病，其预后差，死亡率高，后期随病情发展，导致多器官功能衰竭。促炎和抑炎反应的失调是慢加急性肝衰竭疾病主要的发病机制之一。近年来，调节性T细胞(CD4+ CD25+ Foxp3+Treg细胞)和辅助性T淋巴细胞17（CD4+ Th17细胞）在免疫研究领域受到了广泛的关注，成为了免疫研究的热点。 CD4+ Th17细胞是分化自原始的CD4+T淋巴细胞，它能刺激炎症趋化因子和促炎细胞因子的生成。Th17细胞在一些人类和动物模型的肝脏疾病中发挥重要作用，包括自身免疫性肝病、肝细胞癌、脂肪肝、乙肝病毒相关性慢加急性肝衰竭等。Treg细胞与Th17细胞具有相似的分化过程，并在免疫调节过程中发挥着不同的甚至相反的作用。CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞的重要作用是免疫抑制作用，能抑制组织过度的免疫反应和控制对自身抗原免疫反应，并维持免疫系统的动态平衡。 目前，关于慢加急性肝衰竭的Treg细胞和Th17细胞比例变化的相关的动态变化的实验研究尚少见，而慢加急性肝衰竭疾病中的动态变化研究更是少见。故本实验旨在研究Treg细胞和Th17细胞在慢加急性肝衰竭大鼠中的动态变化及其作用，探讨其可能的机制，为临床免疫治疗提供实验基础。 方法: 首先，雄性SD大鼠被随机分为两组:正常对照组（N组:6只）和实验组(98只)。实验组大鼠每三天一次予腹腔内注射体积比为1∶1的四氯化碳花生油溶液，共10周，建立肝硬化大鼠模型。前4周的给药方案是经腹腔内注射50％四氯化碳1.5ml/kg体重，后6周的给药方案是经腹腔内注射50％四氯化碳2.0 ml/kg体重。同时，正常对照组的大鼠予正常饮食和饮水，未予特殊处理。予50％四氯化碳10周后，实验组大鼠再随机分成两组:肝硬化组（C组:6只）和慢加急性肝功能衰竭组(ACLF组)。 ACLF组大鼠经腹腔内注射500 mg/Kg体重的D-氨基半乳糖甘(D-GalN)和80ug/Kg体重的脂多糖(LPS)诱导建立慢加急性肝衰竭大鼠模型。随机选取10只ACLF组大鼠以观察其生存率及其存活状态。ACLF组大鼠在联合D-GalN和LPS诱导后的6h、12 h、24 h、48 h、96 h共五个时间点，在选取的每个时间点分别随机选取6只大鼠留取血液标本及其肝脏组织标本。大鼠肝组织切片采用苏木素-伊红(HE)染色和马松(Masson)染色，显微镜下观察其病理学变化;使用全自动血生化分析仪检测谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST);通过流式细胞仪检测外周血中的Treg细胞和Th17细胞分别占CD4+T淋巴细胞的百分比;ELISA法检测血清中的白介素(IL)-10和干扰素-γ(IFN-γ);蛋白质印迹法检测肝组织中Foxp3和RORγ蛋白含量。应用统计软件(SPSS)21.0对各组数据进行统计分析，当p＜0.05时，提示差异有统计学意义。 结果: 成功建立了肝硬化大鼠模型和慢加急性肝衰竭大鼠模型。ACLF组的肝脏组织HE染色可见大量炎症细胞的浸润和坏死的肝细胞，Masson染色观察到大量的增生的纤维组织。C组大鼠与N组大鼠相比:血清ALT、AST水平显著升高(220.8±47.0vs.66.2±12.8,p＜0.01;333.3±55.2 vs.146.3±38.7,p＜0.01)，血清IFN-γ水平显著升高（96.87±6.84 vs.31.29±3.28，p＜0.01），血清IL-10水平无显著变化(35.33±5.75 vs.32.84±5.48，p＞0.05)，肝组织Foxp3蛋白相对表达量显著增加（2.48±0.14 vs.1.0±0，p＜0.01)，肝组织RORγ蛋白表达量显著增加（2.07±0.34 vs.1.0±0，p＜0.01)，外周血Treg细胞比例显著升高（3.776±0.687 vs.3.013±0.330，p＜0.05），外周血Th17细胞比例显著升高(0.719±0.301 vs.0.252±0.069，p＜0.05)。 ACLF组大鼠的ALT和AST水平随时间点的变化，都呈现出先升高的趋势，并于24 h达到高峰，后呈下降的趋势，且每个时间点的亚组都高于C组(FALT=212.394，p＜0.01; FAST=60.583，p＜0.01)。在ACLF组中，大鼠的血清IFN-γ水平、外周Th17细胞比例和肝脏组织RORγ蛋白水平呈现为先增高，于24h/48h达到高峰，后显著减少，其与C组大鼠相比（FIFN-γ=34.781，p＜0.01; FTh17=17.460，p＜0.01; FRORγ=13.445，p＜0.01);血清IL-10水平、外周Treg细胞比例和肝组织Foxp3蛋白水平的变化则呈下降的趋势，后趋于稳定，与C组大鼠相比(FIL-10=6.750，p＜0.01;FTreg=3.848，p＜0.01;FTr。g=34.073,p＜0.01)。 结论: Treg细胞和Th17细胞在慢加急性肝衰竭的免疫机制中发挥了重要作用。Th17细胞比例及其相关的细胞因子水平的增加，和Treg细胞比例及其相关的抗炎水平的减少，我们推测Treg细胞亚群的在ACLF模型中不能发挥正常的免疫抑制功能，并于ACLF模型后期促炎细胞因子分泌能力减弱，抗炎细胞因子的分泌也减弱，发生了免疫麻痹。