【摘 要】
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目的建立一种运用PCR-RFLP简单地对弓形虫不同分离株分型鉴定的方法.也采用PFGE技术分析中国弓形虫不同分离株、国际标准毒力株RH株及其突变体的分子核型,结合基因定位,从染
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目的建立一种运用PCR-RFLP简单地对弓形虫不同分离株分型鉴定的方法.也采用PFGE技术分析中国弓形虫不同分离株、国际标准毒力株RH株及其突变体的分子核型,结合基因定位,从染色体DNA数目、大小及DNA电泳迁移等特征上了解弓形虫不同分离株的同源性与差异;比较具有免疫保护作用的紫外线减毒和热杀死弓形虫RH株与正常RH株之间的染色体DNA差别,揭示虫株毒力差异的遗传基础.该研究旨在为弓形虫的毒力研究、分子流行病学、弓形虫病的防治等提供科学的理论依据.结论该实验中采用的虫株繁殖和纯化方法获得了较好纯度的弓形虫虫体.PCR法从基因组中成功扩增探针基因并用DIG标记为探针,探针有较好的敏感度和特异性.PCR-RFLP的多态性把5个弓形虫分离株分为两种酶切谱类型.中国弓形虫分离株、RH株及其突变体之间的PFGE电泳核型大部分相似,这表明不同分离株存在一定的同源性,但PFGE同时显示不同分离株之间染色体DNA大小的多态性,它可能是弓形虫不同分离株毒力差异的基础.基因定位分析也表明各分离株间存在部分差异.PFGE电泳核型和基因定位分析把8个分离株分为3个类型.
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