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目的:通过三个研究评估钙卫蛋白在儿童食物过敏的预测及监测作用,以期对该儿童食物过敏进行动态监测,以最终达到减少儿童过敏性疾病的发生。方法:1、根据纳入标准招募1~4岁健康儿童,收集研究对象的相关资料,并收集粪便标本。以Anthro软件计算按年龄身长(高)/身高Z值(LAZ),按年龄体重Z值(WAZ)和按身长(高)体重Z值(WLZ)。采用ELISA法检测FC浓度。2、20只3周龄的雄性BN大鼠随机分为两组。过敏组予1 mg/只OVA经口灌胃连续41天,并于第42天予100 mg/只OVA经口灌胃激发。对照组予等体积生理盐水经口灌胃。每7天记录两组大鼠的身长、体重、进食量以及大鼠外观和粪便性状的变化。于第42天行过敏症状评分,并分别检测OVA-IgE和组胺水平。判定动物致敏的方法为过敏组大鼠血清中OVA-IgE水平≥对照组大鼠血清中OVA-IgE水平均数+3标准差(x+3SD)。3、80只3周龄雄性BN大鼠随机分为对照组和过敏组进行致敏和激发实验(方法同上)每7天记录两组大鼠的身长和体重。每7天分别处理两组大鼠,收集血清、血浆、空肠、肝脏和脾脏标本(5只/组)。于第42天灌胃后,行过敏症状评分,并收集上述标本(15只/组)。分别检测OVA-IgE;组胺和S100A8/A9;脾脏Th1相关因子(FN-γ)和Th2相关因子(IL-4和IL-5);观察空肠中肥大细胞和嗜酸性粒细胞;检测空肠S100A8和S100A9;FC;空肠和肝脏中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β和IL-6水平。从28日龄BN大鼠的股骨和胫骨骨髓提取树突状细胞行体外培养,并分为五组,分别予OVA、S100A8+OVA、S100A9+OVA、S100A8/S100A9+OVA干预,并设空白对照,分别检测树突状细胞表面分子CD86、CD11c及MHC-Ⅱ的水平;从大鼠脾脏中分离并培养CD4~+T细胞,与上述五组分别共培养48 h后,检测上清液中Th1相关因子和Th2相关因子的水平。结果:1、共纳入1~4岁健康儿童274名,所有儿童的FC水平为非正态分布,中位数为83.19μg/g。FC水平随着年龄增长出现下降趋势(P=0.016)。两两比较发现,1~2岁组和3~4岁组的粪便钙卫蛋白水平差异具有统计学意义(P=0.007)。在所有儿童中,FC与年龄呈负相关(Spearman’s rho=-0.167,P=0.005),而与LAZ,WLZ,WAZ,出生体重或身长无关。2、两组大鼠在各个观察时间点的身长和体重均无差异(P均>0.05);过敏组大鼠在第21天的进食量低于对照组(P<0.05)。灌胃期间,两组大鼠粪便性状无明显差异,第42天激发后,过敏组大鼠出现不同程度过敏反应表现,对照组大鼠无异常症状。过敏组大鼠OVA-IgE和组胺水平较对照组升高(P均<0.05),且致敏率为90.00%。3、各个观察时间点过敏组相比对照组的OVA-IgE、组胺、血浆IL-4和IL-5水平升高,INF-γ水平降低(P均<0.05);第42天过敏组大鼠的过敏症状评分(30分)高于对照组(0分),P<0.05,并且肥大细胞和嗜酸性粒细胞数量增多、肠粘膜破坏增加。过敏组FC、血浆S100A8/A9、S100A8和S100A9 mRNA的表达、相关炎症因子的水平在各个观察时间点均高于对照组(P均<0.05)。FC与血浆S100A8/A9、TLR4、NF-κB及TNF-α均呈正相关(P均<0.05)。细胞培养中,CD11c+、CD86+和MHCII+自S100A8/A9+OVA组、S100A9+OVA组、S100A8+OVA组、OVA组至空白组逐渐下降;共培养后从空白组、OVA组、S100A8+OVA组、S100A9+OVA组至S100A8/A9+OVA组,Th2相关因子的表达逐渐上升,而Th1相关因子表达下降(P均<0.05)。结论:1、建议以<419μg/g作为1~4岁儿童人群的FC参考范围;并建议对该年龄段FC水平>419μg/g人群进行长期随访以排除儿童肠道炎症性疾病的可能。2、采用全程OVA经口灌胃,且不使用佐剂所诱导的BN大鼠食物过敏模型建立成功,致敏率较高。3、钙卫蛋白以及其它炎症因子在食物过敏进程中起了促进作用。FC在食物过敏大鼠中显著增加,可考虑用于预测食物过敏的发生。