新型支架材料HA/CPP/PLLA复合自体骨髓间充质干细胞修复兔膝关节软骨全层缺损

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目的 1.探讨体外进行骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离、培养和鉴定的方法。2.测定复合支架材料HA/CPP/PLLA物理力学性能及其生物相容性。3.研究骨髓间充质干细胞(MSCs)复合HA/CPP/PLLA修复兔膝关节全层软骨缺损的疗效。4.探讨复合材料HA/CPP/PLLA做为软骨组织工程支架材料的可行性。 方法 1.MSCs取自4-6月龄2.5-3.5千克的青紫兰兔,体外分离培养后行细胞表型的鉴定。2.测定原代和传代骨髓间充质干细胞增殖率和平均倍增时间并绘制增殖率曲线,比较不同代数MSCs的增殖能力;3.复合材料HA/CPP/PLLA物理性能及生物相容性性能的检测;4.MSCs种植于HA/CPP/PLLA支架上体外培养4h,细胞支架复合物移植于兔膝关节全层软骨缺损模型处。选用健康的青紫兰兔36只,随机分成A、B、C三个处理组各12只,A处理组双侧股骨髁间窝软骨缺损处植入HA/CPP/PLLA与自体骨髓间充质干细胞复合物;B处理组单纯植入HA/CPP/PLLA;C处理组不作任何植入。分别于术后4、8、12周各处死4只兔子,取材进行大体、组织学及免疫组化染色观察,根据关节软骨组织学计分标准进行评分,数据输入SPSS 10.0软件统计分析,比较各组的评分差异是否具有统计学意义。
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