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目的：通过对非酒精性脂肪性肝病（Nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）大鼠肝细胞、Kupffer细胞SREBP-1c信号通路相关基因和蛋白表达水平的研究，从细胞分子水平探讨NAFLD发病机制及疏肝健脾方药的干预作用机制。方法：75只雄性SD大鼠适应性饲养1w，根据体重采用随机数字表法随机分为5组，每组15只（其中9只用于常规指标检测，6只用于提取肝细胞、Kupffer细胞）。分别是：正常组、模型组、疏肝组、健脾组、合方组。正常组给予维持期饲料喂养，其余各组给予高脂饲料喂养，同时各用药组大鼠按10mL/kg·BW灌服相应方药，正常组和模型组灌服实验动物饮用水，连续8w。具体是：疏肝组(灌服柴胡疏肝散9.6g·kg-1)；健脾组(灌服参苓白术散30g·kg-1)；合方组(灌服柴胡疏肝散和参苓白术散合方39.6g·kg-1)。8w后，各组大鼠取9只，3%戊巴比妥钠腹腔麻醉，腹主动脉采血，肝组织匀浆取上清，全自动生化分析仪检测各组大鼠血清AST、ALT、TG、TC、HDL-C、LDL-C及肝组织上清TG、TC含量；HE及油红O染色观察肝组织病理。各组剩余6只大鼠采用离体循环灌注Ⅳ型胶原酶、差速离心、密度梯度离心法分离肝细胞、Kupffer细胞，Q-PCR及Western blot检测肝细胞、Kupffer细胞SREBP-1c、SCD-1mRNA及蛋白表达水平。结果：1肝组织病理观察HE染色正常组大鼠肝小叶轮廓清晰，中央静脉位于肝小叶正中，肝窦结构正常，肝索以中央静脉为轴心呈放射状排列。肝细胞呈多边行，细胞核位于细胞中央，核大而圆，染色明显，细胞质丰富呈红染，无空泡。模型组大鼠肝小叶轮廓欠清晰，中央静脉可见，肝窦结构难以辨认，肝索结构紊乱，排列不齐，肝细胞肿胀，细胞核位于细胞边缘，细胞浆内可见大小不等的小空泡，有的肝细胞小空泡融合成大泡。各用药组大鼠肝组织结构介于正常组与模型组之间，其中以疏肝组大鼠肝组织结构与正常组最为相似，提示疏肝组方药改善NAFLD大鼠肝组织病理疗效较好。油红O染色正常组大鼠肝细胞核呈淡蓝染色，少许肝细胞胞浆内可见散在的红染脂滴。模型组大鼠肝细胞肿胀，细胞核呈深蓝染色，细胞浆可见大量红色脂滴，少许肝细胞脂滴融合成大脂滴。各用药组大鼠肝细胞脂滴含量介于正常组与模型组之间，其中以疏肝组大鼠肝细胞脂滴含量与正常组最为接近，提示疏肝组方药减少NAFLD大鼠脂肪沉积疗效较好。2ALT、AST含量测定实验结果显示，与正常组比较，模型组大鼠血清ALT、AST均有所升高，但无统计学意义（P>0.05）。与模型组比较，各用药组大鼠血清ALT、AST均有所降低，但无统计学意义（P>0.05）。各用药组组间比较无统计学意义（P>0.05）。提示NAFLD大鼠不一定存在血清ALT、AST升高，这也从另一个侧面反映出虽然NAFLD大鼠存在严重的脂质代谢紊乱，肝细胞内大量脂肪蓄积，但是肝细胞仍未达到严重坏死的受损程度。3血脂及肝脂含量测定血脂实验结果显示，与正常组比较，模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C含量显著升高（P<0.01），HDL-C含量显著降低（P<0.01）；与模型组比较，各用药组大鼠血清TC、LDL-C含量显著降低（P<0.05，P<0.01），疏肝组大鼠血清TG含量显著降低（P<0.01），HDL-C含量显著升高（P<0.01）；各用药组组间比较，疏肝组大鼠血清HDL-C含量明显高于健脾组及合方组（P<0.01），LDL-C含量明显低于健脾组及合方组（P<0.05，P<0.01）。提示NAFLD大鼠存在严重的脂质代谢紊乱，疏肝健脾方药可不同程度降低NAFLD大鼠的血脂，以疏肝组作用最为显著。肝脂实验结果显示，与正常组比较，模型组大鼠肝组织TC、TG含量显著升高（P<0.01）；与模型组比较，疏肝组大鼠肝脂质肝组织TC、TG含量显著降低（P<0.05）。各用药组组间比较无统计学意义（P>0.05）。提示NAFLD大鼠肝脂含量显著升高，疏肝健脾方药可不同程度降低NAFLD大鼠肝脂含量，以疏肝组作用最为显著。4肝细胞、Kupffer细胞SREBP-1c信号通路相关基因及蛋白表达水平实验结果显示，与正常组比较，模型组大鼠肝细胞、Kupffer细胞SREBP-1c、SCD-1mRNA及蛋白表达水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较，各用药组大鼠肝细胞、Kupffer细胞SREBP-1c、SCD-1mRNA及蛋白表达水平显著降低（P<0.05，P<0.01）。各用药组组间比较，疏肝组大鼠肝细胞SREBP-1c、SCD-1mRNA表达水平明显低于健脾组（P<0.05），Kuppfer细胞SREBP-1c mRNA表达水平明显低于合方组（P<0.05），SCD-1mRNA表达水平明显低于健脾组（P<0.05）。提示NAFLD大鼠肝细胞、Kupffer细胞SREBP-1c信号通路的激活可能是NAFLD的发病机制之一，SREBP-1c、SCD-1mRNA及蛋白可能是疏肝健脾方药抗NAFLD的有效作用作用靶点。结论：1.采用高脂饲料喂养SD大鼠8w可成功复制NAFLD模型，该模型与人类常见NAFLD类型发病机制、肝组织病理学改变、血脂、肝脂及血清酶学变化较为相似，是研究人类NAFLD发病机制较为合适的动物模型。2.高脂饮食是人类常见NAFLD类型的主要病因，肝郁脾虚且以肝郁偏重可能是NAFLD的基本病机之一。3.疏肝健脾方药可能是通过调节脂质代谢紊乱，减少肝脏脂质沉积，发挥抗NAFLD作用。4.肝细胞、Kupffer细胞SREBP-1c信号通路激活，上调TC、TG合成，过多的脂质沉积于肝脏可能是NAFLD的发病机制之一。SREBP-1c、SCD-1mRNA及蛋白可能是潜在的抗NAFLD有效作用靶点。5.疏肝健脾方药可能是通过抑制肝细胞、Kupffer细胞SREBP-1c信号通路激活，下调TC、TG合成，减少肝脏脂质沉积，发挥抗NAFLD作用。SREBP-1c、SCD-1mRNA及蛋白可能是疏肝健脾方药抗NAFLD的有效作用靶点。