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目的:探讨脊髓水平KIF17与mLin10间相互作用介导的NR2B转运在小鼠骨癌痛维持中的作用。方法:雄性C3H/HeJ小鼠采用随机数字表法分为正常对照组(Normal组)、假手术组(Sham组)、癌痛模型组(Tumor组)。将含2×105个纤维肉瘤NCTC 2472细胞的最小必需培养基(α-MEM)注射到Tumor组小鼠右侧股骨远端骨髓腔内,制作骨癌痛模型;Sham组注入不含肿瘤细胞的α-MEM; Normal组正常饲养,不进行任何处理。接种后第14 d Tumor组进一步随机分为溶媒对照组(Vehicle组)、小肽同分异构体组(Myr-WP-13组)和小肽处理组(Myr-RC-13组)。Myr-RC-13组鞘内注射小肽Myr-RC-13 10μg (5 μl,溶于10%DMSO),每天1次,连续3天;Vehicle组和Myr-WP-13组在相同时间点分别鞘内给予相同体积的溶媒(10%DMSO)和小肽Myr-WP-13 10μg。各组于接种前1d,接种后第3 d、5d、7d、10d、14d以及重复给药后第1d、3d和7d检测痛行为学指标,包括机械性缩足阈值和自发抬足次数。按照实验目的或实验分组,在相应时间点待行为学测定完成后处死小鼠,采用免疫印迹、免疫荧光、免疫共沉淀等方法检测脊髓水平相应蛋白的表达情况或小肽作用情况。结果:(1) Sham组和Tumor组小鼠在接种后第3d都出现机械性缩足阈值的降低,但两组之间的差异无统计学意义;于接种后第5 d,两组小鼠的机械性缩足阈值均恢复到接种前水平。接种后第7 d,Tumor组小鼠的机械性缩足阈值(0.90±0.28)g与术前基础值(1.93±0.21)g和同一时间点的Sham组(1.78土0.31)g相比显著降低(P<0.05);自发抬足次数(4.43±0.62次)与术前基础值(2.25±0.44次)和同一时间点的Sham组(1.98±0.62次)相比明显增加(P<0.05),且随时间延长而逐渐加重,并于接种后第14d达到高峰,分别为(0.42±0.18)g和(11.11±1.42次)。同行为学发展趋势较为一致的是,脊髓水平KIF17、NR2B和mLin10蛋白的表达水平随时间延长而较术前基础值显著增加(P<0.05)。(2)免疫共沉淀结果显示:与Vehicle组(0.80±0.13)相比,鞘内给予小肽Myr-RC-13后,小鼠脊髓水平mLin10/KIF17间相互作用的比率(0.23±0.03)显著降低(P<0.05),而Myr-WP-13无此效果(0.72±0.12,P>0.05)。(3)重复三天给予溶媒或小肽后,RC-13组小鼠痛行为学在给药结束后第1d达到最大程度缓解,即机械性缩足阈值(1.78±0.31)g和自发抬足次数(6.88±1.13次),与同一时间点的Vehicle组和WP-13组相比均有显著统计学差异(P<0.05),至给药结束后第7d恢复至给药前水平。免疫印迹结果显示,给药结束后第1 d,与Vehicle组和Myr-WP-13组相比,Myr-RC-13组小鼠脊髓水平KIF17、 NR2B和mLin10蛋白表达均显著降低(P<0.05),免疫荧光结果也显示KIF17和NR2B的荧光亮度在第1d有较明显的减弱。结论:脊髓水平KIF17与mLin10间相互作用介导的NR2B转运在骨癌痛的维持中起重要作用;鞘内注射KIF17竞争性小肽抑制剂Myr-RC-13能够有效缓解骨癌痛小鼠的痛行为学。