AgNO、GA、S-3307对水稻花药培养的组合效应及染色体倍性鉴定新方法

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花药培养技术的应用为水稻育种提供了一条快速有效的途径.但目前花培育种在花药培养方法上仍存在着工作量大、工作效率低的矛盾,技术上仍存在花药培养力低、绿苗加倍率低以及后代鉴定方法贫乏等问题,限制了花培技术在育种中的应用.该文针对以上问题,结合实验室条件,做了一些研究,结果如下:1.比较了AgNO<,3>、S-3307和GA<,3>三种物质对水稻花药培养的单一和组合作用效应.在愈伤组织诱导和分化培养基中分别添加AgNO<,3>、S-3307和GA<,3>,分别促进了愈伤组织诱导率和绿苗分化率的提高;其中AgNO<,3>对水稻花培愈伤诱导率的作用出现反弹现象,即先抑制诱导率,而后为促进作用.而三种物质两两组合中,都可以得到较佳组合,与对照相比,显著提高了愈伤组织诱导率和绿苗分化率;S-3307分别与其它两种物质组合时,两种物质之间表现为互相抑制作用;AgNO<,3>和GA<,3>两两组合则为互相促进作用.2.对气孔大小和气孔密度、保卫细胞叶绿体数目以及一系列植株形态进行观测统计分析,探索快速鉴定水稻花培植株染色体倍性鉴定简便有效的方法.对水稻花培植株单倍体和二倍体植株的气孔性状观测发现,单倍体和二倍体植株的气孔长度和叶绿体数在1%水平差异显著.对水稻再生植株不同叶位的叶长和叶宽的观测发现,倒2叶长可以区分水稻花培单倍体和二倍体植株;颖花性状、花药大小、穗长等数据的统计分析表明,颖长、颖宽、花药长、穗长也可作为水稻倍性鉴定的指标.为了提高叶片气孔性状鉴定植株倍性水平的效率,在对观测植物叶片气孔的各种方法进行比较研究的基础上,探索出用于水稻叶片气孔性状观测的"印迹液撕取法".该方法步骤简单易掌握,可通过显微镜摄影直接在照片上观测气孔大小、气孔密度和叶绿体数等性状.大大提高了水稻植株染色体倍性水平早期鉴定的可行性.
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