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目的:1.研究乳酸脱氢酶C4(LDH-C4)蛋白在鼻咽癌癌组织中的表达情况以及在临床诊疗过程中的价值。2.明确LDHC基因过表达在CNE2鼻咽癌细胞的生物学作用,并初步探讨相关分子机制。方法:1.通过免疫组化染色方法(IHC)检测高通量鼻咽癌组织芯片(共含组织129点)中LDH-C4蛋白的表达量,根据染色的结果进行评分,分析LDH-C4蛋白表达与鼻咽癌患者的年龄、性别、病理分期、复发及预后等临床病理特征的相关性。2.通过慢病毒载体将外源性LDHC基因导入CNE2鼻咽癌细胞,并采用稀释法结合绿荧光表达情况筛选出单克隆化且LDH-C4表达阳性的细胞系。通过CCK-8比色、平板克隆形成、划痕修复实验、Transwell小室等实验,研究LDH-C4表达上调后,CNE2鼻咽癌细胞在体外增殖能力、迁移和侵袭能力的改变;通过Western blot检测AKT/mTOR信号转导通路相关蛋白的表达改变。结果:1.129例高通量鼻咽癌组织标本结果显示:LDH-C4主要表达于鼻咽癌细胞的细胞质中,阳性率为88.4%(114/129);Spearman相关性分析结果表明,鼻咽癌的临床分期、颈部淋巴结转移均与LDH-C4的表达水平呈正相关(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析表明,LDH-C4低水平患者预后明显优于高水平患者(P<0.05)。2.成功筛选出慢病毒感染后LDH-C4过表达的单克隆化CNE2细胞系;CCK-8比色实验、克隆形成、划痕实验、基质胶Transwell小室等一系列实验,证明LDH-C4过表达可增强CNE2鼻咽癌细胞的生长增殖、克隆形成以及侵袭和迁移能力;Western blot结果证实,LDH-C4在CNE2细胞中过表达可上调AKT、mTOR等蛋白的表达。结论:1.LDH-C4蛋白在鼻咽癌癌组织中的表达量明显增高,并与患者的临床分期、颈部淋巴结转移呈现正相关关系;LDH-C4可作为鼻咽癌预后监测的一项重要指标,其高表达提示患者临床预后不良。2.上调LDH-C4可明显增强CNE2细胞体外增殖、侵袭及迁移能力;LDH-C4促进鼻咽癌侵袭转移可能通过激活AKT/mTOR信号通路起作用。