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山里红（Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.）为蔷薇科山楂属植物,富含多种酚类活性成分。其叶片中多种酚类活性成分均具有抗氧化活性。目前,对于采用HPLC同时测定山里红叶中多种酚类化合物及抗氧化活性的研究未见报道。本文研究山里红叶中酚类化合物的高效分离及抗氧化活性并建立同时测定山里红叶中绿原酸（CA）,牡荆素-4″-O-葡萄糖苷（VG）,牡荆素-2″-O-鼠李糖苷（VR）,荭草苷（ORT）,芦丁（RT）,牡荆素（VIT）和金丝桃苷（HYP）的方法。在单因素实验基础上,应用响应面法（RSM）中的Box-Behnken（BBD）进行实验设计,对超声辅助提取（UAE）条件进行优化。对比超声辅助提取法、浸渍提取法和热回流提取法对酚类化合物含量的影响。通过对提取物的DPPH自由基清除能力,ABTS自由基清除能力和还原能力实验评价其抗氧化活性。研究结果如下:1.建立HPLC法检测样品中的酚类化合物,在检测波长350 nm处,32 min内,同时测定7种酚类化合物含量。在此系统下,绿原酸、牡荆素-4″-O-葡萄糖苷、牡荆素-2″-O-鼠李糖苷、荭草苷、芦丁、牡荆素和金丝桃苷保留时间分别为8.82 min、10.69 min、14.88 min、18.59 min、21.16 min、23.89 min和31.55 min。该方法具有较好的分离度,七种酚类化合物的线性关系、定量限和检测限、精确度、重现性、稳定性和回收率良好。方法学验证结果可靠准确,可用于绿原酸、牡荆素-4″-O-葡萄糖苷、牡荆素-2″-O-鼠李糖苷、荭草苷、芦丁、牡荆素和金丝桃苷七种成分的定性定量分析。2.通过对超声辅助提取法中的影响因素进行单因素分析,获得单因素最佳条件为料液比1:15、温度40℃、乙醇浓度40%和时间25 min。在最优条件下,酚类化合物的提取率分别可达到5.73 mg/g、6.20 mg/g、6.28 mg/g和6.34 mg/g。通过单因素实验和响应面分析中Box-Behnken实验设计,在最佳提取条件下（温度41℃,时间31 min,料液比1:15,乙醇浓度39%）,提取物中CA、VG、VR、ORT、RT、VIT和HYP的含量分别为0.46 mg/g、0.38 mg/g、4.37 mg/g、0.033 mg/g、0.036 mg/g、0.30 mg/g和1.19 mg/g。3.采用超声辅助提取法、浸渍提取法和热回流提取法对山里红叶中七种酚类化合物含量进行考察。结果显示,使用超声辅助提取法提取七种酚类化合物的提取效率更高为6.017 mg/g,浸渍提取为4.862 mg/g和热回流提取3.938 mg/g。因此,相比传统的浸渍提取和热回流提取,超声辅助提取法更适用于山里红叶中酚类化合物的含量提取研究。4.抗氧化活性研究:实验采用DPPH法、ABTS法、铁离子还原能力法对不同提取方法获得的山里红叶提取物进行抗氧化活性评价。提取物的DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和铁离子还原能力被分别确定为0.69 mg/m L(IC50值)、0.86mmoL/g和0.24 mg/mL(IC50值)。结果表明,三种制备方法得到的山里红叶提取物均具有一定的抗氧化活性,但超声辅助提取法获得的提取物抗氧化活性更好,其可以作为开发成本低廉的天然抗氧化剂研究的重点。综上所述,建立的高效液相色谱法可同时测定山里红叶中七种酚类化合物,其检测方法快速、高效、简便。超声辅助提取法是获得山里红叶中酚类化合物的一种有效的可替代的方法,并且其提取物具有潜在的抗氧化活性,可利用其潜在属性在食品工业中充当添加剂。