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目的:观察肾母细胞瘤(WT)患儿外周血NK细胞经IL-2、IL-15扩增后对肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞的杀伤作用。方法:以8例WT患儿作为病例组,8例健康体检儿童作为对照组。采集每例外周血4ml,按Ficoll法分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞仪检测、分选两组PBMC中CD3-CD16+CD56+NK细胞;另采集病例组和对照组外周血4ml,分离PBMC后,分两组进行培养[IL-2(100U/mL)培养组、IL-2(100U/mL)联合IL-15(10ng/mL)培养组],流式细胞仪检测、分选培养后CD3-CD16+CD56+NK细胞。CCK8法检测在不同效靶比(E:T 5:1,10:1,20:1)(效应细胞:NK细胞,靶细胞:SK-NEP-1)情况下,WT患儿外周血NK细胞经IL-2、IL-15扩增后对SK-NEP-1细胞的杀伤作用。Western blot检测培养前、IL-2培养组、IL-2联合IL-15组CD3-CD16+CD56+NK细胞中TNF-α及TNF-β表达情况。结果:病例组和对照组采用IL-2联合IL-15扩增后的NK细胞比例分别增加[(7.3±2.4%)v.s(21.2±3.2%)],[(4.5±1.6%)v.s(10.1±3.4%)];数量分别增高(70.60±22.5)、(30.12±33.16)倍(P<0.05)。E:T为10:1、20:1时,与单用IL-2扩增比较,IL-2联合IL-15扩增组的NK细胞对肾母细胞瘤细胞的杀伤作用分别增强[(16.3±2.1)v.s(10.5±1.6)]、[(23.9±3.2)v.s(13.7±2.5)](P<0.05)。病例组患儿外周血CD3-CD16+CD56+NK细胞采用IL-2联合IL-15培养后TNF-α和TNF-β的表达量,较IL-2组、培养前,均显著增加(P<0.05)。结论:IL-2联合IL-15能够提高患儿外周血NK细胞的比例及数量,增加其分泌TNF的能力,从而提高其对肿瘤的杀伤作用。