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目的基于前期研究基础,观察益气活血通络法及其代表方脑络欣通对局灶性脑缺血/再灌注模型大鼠缺血侧脑组织形态,局部脑组织血流量,额顶叶皮质或缺血半暗带血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF）、血管生成素-1（Angiopoietins-1,Ang-1）、内皮细胞标记（endothelial cell marker,CD34）蛋白表达,血小板ADP受体亚基（Platelet ADP receptor subunit,P2Y12）受体信号转导通路和SCF/c-kit信号通路的影响,探讨其对局灶性脑缺血凝血与纤溶、血管再生的影响。方法实验分为实验一和实验二两部分进行。两个实验均将SD大鼠随机分为假手术组（J）、模型组（M）、通心络组（T）和益气活血通络组（YQ）,假手术组仅作动脉分离,其余采用改良线栓法建立大脑中动脉闭塞再灌注（MCAO/R）大鼠右侧脑缺血模型,每组24只,再分为3、7、14 d三个亚组,灌胃给药。实验一运用HE染色和尼氏小体染色分别观察模型大鼠额顶叶皮质形态变化,免疫荧光检测缺血侧额顶叶皮质P2Y12的蛋白水平,免疫组织化学染色法检测缺血侧额顶叶皮质缺血半暗带PLC、PI3K、TNF-α蛋白的表达,Western blot法检测缺血侧额顶叶皮质AKT的蛋白水平。实验二运用激光多普勒仪检测模型大鼠局部脑血流量（Regional cerebral blood flow,r CBF）,免疫组织化学染色法检测缺血侧额顶叶皮质缺血半暗带VEGF、Ang-1、CD34蛋白的表达,Western blot法检测缺血侧额顶叶皮质酪氨酸激酶生长因子受体（Tyrosine kinase growth factor receptor,C-kit）、干细胞因子（Stem cell factor,SCF）的蛋白水平,基因芯片检测SCF/C-kit信号通路的43个基因表达情况。结果实验一:⑴HE和尼氏小体染色显示:益气活血通络法减轻脑缺血再灌注模型大鼠额顶叶皮质缺血坏死区变性坏死,增加缺血半暗带区尼氏小体数量。⑵P2Y12免疫荧光显示:与J组比较,M组额顶叶皮质P2Y12表达3d、7d、14d显著升高（P<0.01）;与M组比较,T组P2Y12表达3d降低（P<0.05）,7d、14d显著降低（P<0.01）,YQ组P2Y12表达3d、7d、14d显著降低（P<0.01）;与T组比较,YQ组P2Y12表达无统计学意义（P>0.05）。⑶免疫组化结果显示:（1）磷脂酶C（Phospholipase C,PLC）:与J组比较,M组额顶叶皮质PLC阳性面积的表达3d、7d、14d显著升高（P<0.01）;与M组比较,其余各组PLC阳性面积3d、7d显著降低（P<0.01）,YQ组14d显著降低（P<0.01）;与T组比较,YQ组3d、7d显著降低（P<0.01）,YQ组14d降低（P<0.05）。与J组比较,M组PLC平均光密度3d表达降低（P<0.05）,7d、14d表达无统计学意义（P>0.05）;与M组比较,其余各组PLC平均光密度3d、7d、14d表达无统计学意义（P>0.05）。（2）磷脂酰肌醇-3羟基激酶（Phosphoinositide 3kinase,PI3K）:与J组比较,M组额顶叶皮质PI3K阳性面积3d、7d、14d显著升高（P<0.01）;与M组比较,T组额顶叶皮质PI3K阳性面积3d显著降低（P<0.01）,7d、14d无统计学意义（P>0.05）,YQ组PI3K 3d、7d显著降低（P<0.01）,14d无统计学意义（P>0.05）;与T组比较,YQ组3d、7d、14d无统计学意义（P>0.05）。与J组比较,M组PI3K平均光密度3d、7d、14d均显著降低（P<0.01）;与M组比较,T组PI3K平均光密度3d升高（P<0.05）,7d、14d无显著变化,YQ组PI3K平均光密度3d、7d显著升高（P<0.01）,14d无显著变化;与T组比较,YQ组3d、7d升高（P<0.05）,14d无统计学意义（P>0.05）。（3）肿瘤坏死因子-α（Tumor Necrosis Factor,TNF-α）:与J组比较,M组额顶叶皮质TNF-α阳性面积3d、7d显著升高（P<0.01）,14d升高（P<0.05）;与M组比较,T组和YQ组额顶叶皮质TNF-α阳性面积3d、7d、14d均显著降低（P<0.01）;与T组比较,YQ组3d、7d、14d无统计学意义（P>0.05）。与J组比较,M组TNF-α平均光密度3d显著降低（P<0.01）,7d、14d无统计学意义（p>0.05）;与M组比较,T组TNF-α平均光密度3d、7d显著升高（P<0.01）,14d无统计学意义（p>0.05）,YQ组三天显著升高（P<0.01）,7d、14d无统计学意义（p>0.05）;与T组比较,YQ组3d、7d显著降低（P<0.01）,14d无统计学意义（p>0.05）。⑷Western blot结果显示:与J组比较,M组额顶叶皮质蛋白激酶B（Protein kinase B,AKT）蛋白水平3d、7d、14d显著升高（P<0.01）;与M组比较,T组额顶叶皮质AKT和YQ皮组3d、7d、14d显著降低（P<0.01）;与T组比较,YQ组14d降低（P<0.05）。实验二:⑴r CBF检测结果显示:插线后5min,与J组比较,M组、T组、YQ组3d、7d、14d所有大鼠r CBF显著降低（P<0.01）;其余各组比较无统计学意义（P>0.05）。与J组比较,M组r CBF取材前3d、7d、14d显著降低（P<0.01）;与M组比较,T组与YQ组r CBF取材前3d、7d、14d显著升高（P<0.01）;与T组比较,YQ组无统计学意义（P>0.05）。⑵免疫组化结果显示:（1）VEGF:与J组比较,M组额顶叶皮质VEGF阳性面积3d、7d显著降低（P<0.01）,14d无统计学意义（P>0.05）;与M组比较,T组和YQ组额顶叶皮质VEGF阳性面积3d、7d显著升高（P<0.01）,T组14d升高（P<0.05）和YQ组14d显著升高（P<0.01）;与T组比较,YQ组三天、14d升高（P<0.05）,7d显著升高（P<0.01）。与J组比较,M组VEGF平均光密度3d、7d显著升高（P<0.01）,14d无统计学意义（P>0.05）;与M组比较,T组和YQ组VEGF平均光密度3d、7d显著降低（P<0.01）,14d无统计学意义（P>0.05）;与T组比较,YQ皮组3d、7d、14d无统计学意义（P>0.05）。（2）Ang-1:与J组比较,M组额顶叶皮质Ang-1阳性面积3d、7d、14d显著降低（P<0.01）;与M组比较,T组和YQ组Ang-1皮质阳性面积3d、7d、14d显著升高（P<0.01）;与T组比较,YQ组3d、7d显著升高（P<0.01）,14d无统计学意义（P>0.05）。与J组比较,M组Ang-1平均光密度3d、7d显著升高（P<0.01）,14d无统计学意义（P>0.05）;与M组比较,T组Ang-1均光密度3d显著降低（P<0.01）,7d降低（P<0.05）,14d无统计学意义（P>0.05）,YQ组Ang-1皮质平均光密度值3d、7d显著降低（P<0.01）,14d无统计学意义（P>0.05）;与T组比较,YQ组3d、7d、14d无统计学意义（P>0.05）。（3）CD34:与J组比较,M组额顶叶皮质CD34阳性面积3d、7d显著降低（P<0.01）,14d无统计学意义（P>0.05）;与M组比较,T组和YQ组额顶叶皮质CD34阳性面积3d、7d、14d显著升高（P<0.01）;与T组比较,YQ组3d、14d升高（P<0.05）,7d显著升高（P<0.01）。与J组比较,M组CD34平均光密度3d显著升高（P<0.01）,7d、14d无统计学意义（P>0.05）;与M组比较,T组和YQ组CD34皮质平均光密度3d显著降低（P<0.01）,7d、14d无统计学意义（P>0.05）;与T组比较,YQ组3d、7d、14d无统计学意义（P>0.05）。⑶Western blot结果显示:（1）C-kit:与J组比较,M组额顶叶皮质C-kit蛋白水平3d、7d、14d显著降低（P<0.01）;与M组比较,T组和YQ组额顶叶皮质C-kit蛋白水平3d、7d、14d显著升高（P<0.01）;与T组比较,YQ组3d、7d、14d显著升高（P<0.01）。（2）SCF:与J组比较,M组额顶叶皮质SCF蛋白水平3d、7d、14d显著降低（P<0.01）;与M组比较,T组额顶叶皮质SCF蛋白水平3d升高（P<0.05）,7d、14d显著升高（P<0.01）;YQ组SCF蛋白水平3d、7d、14d显著升高（P<0.01）;与T组比较,YQ组3d、7d、14d显著升高（P<0.01）。⑷SCF/c-kit基因芯片检测结果显示:M组与J组比较:Cma1基因表达有显著差异（Fold Upor Down-Regulation>2）;T组与M组比较:Grb7基因表达有显著差异（Fold Upor Down-Regulation>2）;Yvs M:Cma1、Grb7、Vav1、Fes基因表达有显著差异（Fold Up-or Down-Regulation>2）。以上基因表达均为上调。结论结果表明,益气活血通络法代表方脑络欣通可能通过降低额顶叶皮质或缺血半暗带P2Y12信号通路中P2Y12、PLC、PI3K、TNF-α、AKT相关蛋白的表达,调节凝血和纤溶,改善血流状态;增强VEGF、Ang-1、CD34蛋白的表达,增加SCF/C-Kit信号通路C-Kit、SCF相关蛋白的表达,促进血管再生,有助于受损脑组织结构和功能恢复。