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目的：应用神经追踪技术研究内脏神经与体神经端侧吻合后神经再生方式及大鼠直肠及肛门外括约肌传出神经通路。方法：成年SPF级雄性SD大鼠36只(240-300g)随机分为四组：端侧吻合组(n=15),背部正中切口行L3-S1椎板切除术,于左侧L4VR侧面神经外膜开窗,在L3水平将左侧L6和S1脊神经切断,将L6VR尾端螺旋状缠绕于L4VR上,并将L6VR尾端端侧吻合于L4VR的侧面。损伤组(n=6),左侧L6和S1脊神经切断,不进行吻合。对照组(n=6),除L6脊神经前根外的左侧L6和S1脊神经全部切断。正常大鼠组(n=9),不做任何处理。在16周时,端侧吻合组、损伤组及对照组各6只,将荧光金(Fluorogold, FG)注射至左侧盆神经节,3天后将快蓝(Fast Blue, FB)注射至左侧坐骨神经,大鼠再存活7天后取脊髓行冰冻切片荧光显微镜下观察。端侧吻合组及正常大鼠组各9只平均分三组,第一组L4脊髓前角注射HRP,第二组MPG内注射3%快蓝,第三组直肠壁注射4%荧光金。EAS10um横向切片,EAS HRP-TMB显色后光学显微镜下观察。脊髓行冰冻切片荧光显微镜下观察被荧光标记的神经元。结果：逆行追踪结果显示在端侧吻合组FG-FB双标神经元、FG单标神经元主要分布在左侧L4脊髓前角,左侧L3至L5脊髓前角可见FB单标神经元,L6脊髓未见标记的神经元。在损伤组,L3到L5脊髓段只有FB单标神经元,无FG单标或FG-FB双标神经元,L6脊髓段未见被标记的神经元。在对照组中,FG单标记和FB单标神经元分别出现在L6和L3-L5脊髓段,无双标神经元。在左侧L4脊髓前角注射HRP后,端侧吻合组肛门外括约肌中可观察到HRP阳性标记的神经末梢,在正常大鼠组无HRP阳性标记的神经末梢。端侧吻合组与正常大鼠组,直肠壁注射FG后可在MPG观察到FG标记神经元,MPG注射FB后可分别在脊髓L4和L6-S1节段观察到FB标记神经元。结论：在端侧吻合组脊髓L4节段FG-FB双标神经元较多,证明内脏神经-端侧吻合后,再生神经主要再生方式是体神经侧枝发芽。少量FG单标由缝合过程中供体神经损伤引起的轴突的再生。端侧吻合后支配直肠及肛门外括约肌的脊髓中枢发生了改变,由L6、S1脊髓节段转移到了L4脊髓节段。目的：观察内脏神经-体神经端侧吻合后再生神经纤维的形态学特点。方法：成年SPF级雄性SD大鼠24只(240-300g)随机分为三组：端侧吻合组(n=8),左侧L6和S1脊神经切断,将L6VR尾端端侧吻合于L4VR的侧面。损伤组(n=8),左侧L6和S1脊神经切断,不进行吻合。对照组(n=8),除L6脊神经前根外的左侧L6和S1脊神经全部切断。术后16周,沿MPG找到左侧盆副交感神经(left pelvic parasympathetic nerves, PPN),在手术显微镜下取下5mmPPN神经段及吻合口近端5mm L6神经段。PPN及L6神经段用于电镜观察超微结构特点。PPN1um半薄切片甲苯胺蓝染色后统计再生神经纤维数量。结果：神经超微结构显示：在端侧吻合组再生神经L6VR可见大量的有髓神经纤维、无髓神经纤维。再生神经PPN可见大量的有髓神经纤维、无髓神经纤维。损伤组PPN切片中几乎见不到有髓神经纤维轴突。端侧吻合组与对照组盆副交感神经的有髓神经纤维平均数量分别为263±66和579±84。结论：L6VR和L4VR进行端侧吻合后L4VR运动神经元轴突可以长入L6VR,可见大量的再生有髓神经纤维、无髓神经纤维。我们的组织形态学实验证实再生神经PPN平均有髓轴突数量可达到对照组PPN的45.4%。目的：本实验利用肛肠动力学技术研究内脏神经-体神经端侧吻合后直肠平滑肌和肛门外括约肌(external anal sphincter, EAS)协同情况及其可能机制,应用肌电图和形态学技术研究内脏神经-体神经端侧吻合术对供体神经的影响。方法：成年雄性SPF级SD大鼠24只(240-300g)随机分为三组：端侧吻合组(n=8),左侧L6和S1脊神经切断,并将L6VR尾端与L4VR行端侧吻合。损伤组(n=8),左侧L6和S1脊神经切断,不进行吻合。对照组(n=8),除L6脊神经前根外的左侧L6和S1脊神经全部切断。术后16周,端侧吻合组刺激L4VR同时记录直肠压力及肛门外括约肌肌电图。在损伤组刺激L4VR,对照组分别刺激L4VR及L6VR同时记录直肠压力及肛门外括约肌肌电图。术后16周用BL-410生物实验系统检测胫骨前肌及腓肠肌肌电图。沿肌腱起始处仔细分离完整取左右两侧胫骨前肌测量肌肉湿重,并进行HE染色观察肌肉形态。端侧吻合组在L4供体神经吻合口远端和吻合口近端分别取5mm神经片段,对照组取相应位置L4神经片段,石蜡切片甲苯胺蓝染色(Toluidine blue, TB)统计有髓神经纤维数量。结果：端侧吻合组刺激L4VR吻合口近端时肛门直肠测压显示肛门直肠压力在逐步上升,同时诱发EAS的电活动减弱或消失,最大的肛门直肠压力达到27.9±4.5cmH20。在损伤组刺激左侧L4VR时肛门直肠压力没有上升。在对照组中,刺激L6VR时最大的肛门直肠压力达到68.4±6.6cm H2O,用同样的参数刺激左侧L4VR肛门直肠压力无明显升高。左右两侧胫骨前肌的重量分别为0.688±0.061g和0.694±0.059g,两者差别无统计学意义(p>0.1)。左右两侧胫骨前肌及腓肠肌肌电图都未见失神经电位,未见明显肌肉纤维萎缩及变性。L4供体神经吻合口前后神经段及对照组L4神经纤维数量分别为875+83、869±64和882±75,三组神经纤维数量无显著性差异。结论：在端侧吻合组刺激L4VR导致直肠压力的增强,以及同时肛门外括约肌肌电活动减弱,甚至消失,这表明这项技术成功地实现说明了直肠和EAS之间可实现协同作用。左右两侧的胫骨前肌的重量差别没有显着性差异。肌肉湿重、形态、肌电图和L4神经纤维数量无明显变化,证明了端侧吻合对供体神经及其靶器官功能无影响。