【摘 要】
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目的:研究金刚藤含药血清对人肝癌细胞SMMC-7721细胞生长的影响,并基于POLD1基因探讨金刚藤影响肝癌细胞生长的作用机制。方法:选健康成年SD大鼠,按血清药理学通法制备金刚藤含
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目的:研究金刚藤含药血清对人肝癌细胞SMMC-7721细胞生长的影响,并基于POLD1基因探讨金刚藤影响肝癌细胞生长的作用机制。方法:选健康成年SD大鼠,按血清药理学通法制备金刚藤含药血清,用高(体积分数为30%)、低(体积分数为10%)浓度金刚藤含药血清培养液作用于SMMC-7721细胞24h,并设立空白血清及西药环磷酰胺(Cytoxan, CTX)含药血清为对照,流式细胞分析技术检测细胞周期。荧光定量PCR检测高低浓度金刚藤含药血清对SMMC-7721细胞DNA聚合酶δ催化亚基基因(the DNA polymerase δ catalytic subunit gene1, POLD1)表达的影响。结果:1.两组不同浓度的金刚藤含药血清对SMMC-7721细胞周期分布影响不同,低浓度、高浓度含药血清合成期细胞百分比(S-phase fraction, SPF)分别为19.6%、27.9%,与空白组(15.58%、15.9%)相比,金刚藤含药血清作用24h后,两组处于G1期的细胞所占比例逐渐减少,而处于S期细胞所占比例增高,与空白组相比差异有统计学意义(P<0.05)。2.实时荧光PCR结果显示:金刚藤低浓度、高浓度作用肝癌细胞后,POLD1基因表达的CT值分别为26.70±0.11,28.42±0.3,相对于稳定表达的β-actin基因(24.47±0.19,25.87±0.29)其表达比率分别为0.45±0.1,0.28±0.06,与空白对照组比较有统计学差异(P<0.05)。结论:金刚藤含药血清可诱导肝癌细胞阻滞于S期,其机制可能与抑制POLD1基因的表达有关。
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