本文综合介绍了对虾病毒性病原的研究现状和病毒性疾病诊断技术发展现状，同时对应用于对虾病毒性病原的诊断和检测方法做对比分析。根据WSSV，TSV和HPV三种病毒病原在我国境内流行的现状，建立这三种重要的对虾病毒复合核酸探针检测技术。分别利用点杂交和PCR-ELISA原理建立了对虾病毒复合核酸点杂交的检测技术和RT-PCR ELISA同时检测WSSV，TSV和HPV的方法。并克隆TSV三个主要结构蛋白基因，导入大肠杆菌诱导表达，为后期单克隆抗体的制备提供抗原。本文主要结果如下： 1．复合核酸点杂交检测技术利用不同的修饰基团(地高辛，生物素和荧光素)，分别用PCR或随机引物法标记核酸，通过点杂交，选择不同的抗体和底物，利用在硝酸纤维素膜基质上发生的颜色反应来诊断病毒核酸的存在与否。分别建立了同时检测WSSV和TSV，以及WSSV、TSV和HPV的复合点杂交检测方法，检测提纯核酸和感染组织的灵敏度分别为10和100pg。该项检测本技术可以节省检测的成本和时间，为对虾病毒性病原诊断提供更简单快捷的技术 2．复合RT-PCR ELISA在RT-PCR的基础上引入了固相DNA分子杂交步骤，建立复合RT-PCR ELISA同时检测三种病毒的方法。该体系以提取组织的总核酸粗制品为模板，以通过生物素—链亲和素桥固定在96微孔板上的寡核苷酸作捕获探针，与经PCR标记地高辛的检测探针杂交，通过颜色反应来达到检测病毒核酸的目的，提高RT-PCR检测样品的特异性和核酸杂交的灵敏性。 3．TSV主要结构蛋白原核表达 将TSV三个主要的结构蛋白基因克隆到大肠杆菌表达载体上，导入大肠杆菌中诱导表达，形成N端融合的融合蛋白，经与标准分子Marker比较，表达的蛋白分子量分别为54.2，43和51.4kD，去除融合的氨基酸后的分子量分别为51.7，41.5和21.4kD。表达产物均以包涵体形式存在。为后期免疫检测技术的建立奠定了基础。