葎草为桑科植物葎草Humulus scandens(Lour.)Merr.的干燥地上部分,具有清热解毒,利尿通淋的功效,用于肺热咳嗽,发热烦渴,骨蒸潮热,热淋涩痛,湿热泻痢,热毒疮疡,皮肤瘙痒,有较高的药用价值。葎草资源丰富,我国除新疆、青海外,南北各省区均有分布。现已收载于四川、河南、上海、福建等地方中药材标准,河北省药材地方标准中尚未收载。葎草产地分布较广,不同产地间药材质量差异性较大,已有研究表明北京及河北产葎草中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素含量较高,但尚未有人对河北产葎草药材质量进行系统研究。为此,本文开展了河北产葎草药材质量的相关研究。第一部分河北葎草药材的显微和薄层色谱鉴别研究及水分、灰分测定目的:确定河北产葎草的显微鉴别特征和薄层色谱鉴别方法,并测定水分、总灰分、酸不溶性灰分含量。方法:通过对样品处理方法、展开系统、薄层板及碱度、展开温度等实验条件考察,以木犀草素为对照,建立河北产葎草药材薄层色谱鉴别方法;显微鉴别和水分、总灰分及酸不溶性灰分测定按《中国药典》2010版(一部)附录项下规定方法进行。结果:河北产葎草药材粉末显微鉴别,可见纤维、晶细胞、非腺毛、螺纹导管、具缘纹孔导管、叶下表皮细胞、草酸钙簇晶和气孔,具有特征性。薄层色谱条件,薄层板:硅胶G碱性预制板(碱性0.4%);展开剂:甲苯-甲酸乙酯-甲酸(5:4:1),常温下展开。所有样品在与木犀草素对照品相应的位置上,均显相同颜色荧光斑点。河北产葎草药材中水分含量在8.4%~10.0%范围内,平均值为9.4%;总灰分含量在11.8%~15.7%范围内,平均值为13.4%;酸不溶性灰分含量在0.4%~2.3%范围内,平均值为1.1%。结论:纤维、晶细胞、非腺毛、螺纹导管、具缘纹孔导管、草酸钙簇晶、叶下表皮细胞和气孔可用于河北产葎草药材粉末显微特征鉴定。确立的薄层色谱鉴别方法,分离效果好,rf值适中,色谱斑点清晰,且有较好的适应性和重现性,可用于葎草药材的鉴别。水分、总灰分及酸不溶性灰分含量均低于《中国药典》2010版(一部)同类药材限度值。第二部分河北葎草药材中木犀草苷、芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖苷、木犀草素的含量测定研究目的:建立河北产葎草药材中木犀草苷、芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖苷、木犀草素3种成分的含量测定方法,比较河北不同产地、不同月份、雌株、雄株葎草中上述3种成分的含量。方法:高效液相色谱(hplc)法同时测定葎草中木犀草苷、芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖苷、木犀草素3种成分的含量。通过对供试品溶液制备方法、检测波长、流动相、色谱柱的优选,对方法的精密度、稳定性、重现性、加样回收率的考察,建立检测方法。以建立的含量测定方法对不同样品进行检测。结果:系统适用性条件,色谱柱:agilent5tc-c18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速:1.0ml/min;检测波长:340nm;柱温:25℃;进样量:10μl。供试品制备方法:取过3号筛的药材粉末2g,70%甲醇30ml,加热回流提取1h,提取1次。河北不同产地葎草药材,按地理分布由南向北,木犀草苷、芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖苷、木犀草素的含量大体呈上升的趋势,3种成分的含量分别在0.0053%~0.2332%、0.0008%~0.0521%、0.0002%~0.0018%范围内。按不同采收期检测,邢台、石家庄、廊坊、唐山、承德产葎草药材中木犀草苷、芹菜素-7-o-β-d-葡萄糖苷的含量以7、8月份为高;木犀草素的含量,邢台、唐山产葎草药材以7月份含量为高,石家庄、廊坊、承德产葎草药材以9月份含量为高。按雌、雄植株检测,邯郸、邢台、廊坊、唐山、承德的雌株葎草中木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素的含量均比雄株中的含量高,木犀草苷平均含量雌株约是雄株的3倍,芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷和木犀草素平均含量雌株约是雄株的2倍。结论:建立了HPLC法同时测定葎草药材中木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素的含量,该方法简便、准确、重复性好。河北不同产地、不同月份、雌株和雄株葎草中3种成分的含量差别较大。第三部分河北产葎草药材HPLC特征图谱研究目的:建立河北产葎草药材HPLC特征图谱。方法:HPLC法。通过对河北不同产地葎草药材色谱图的测定,确定共有吸收峰,利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004版)》,拟合河北产葎草药材的特征图谱,并对不同产地样品色谱图与特征图谱进行相似度评价。结果:建立了河北产葎草药材的HPLC特征图谱分析方法,该方法具有较好的稳定性和重复性。与拟合的特征图谱相比较,编号S1、S3~S11的葎草药材相似度在0.900以上,即邯郸,衡水,石家庄,保定,沧州,廊坊,唐山,秦皇岛,张家口,承德的葎草药材相似度较高;只有编号S2葎草药材相似度小于0.900,即邢台产葎草药材相似度较低。结论:本实验所拟合的特征图谱可作为河北产葎草药材的特征图谱。