论文部分内容阅读
研究背景及研究目的随着甲苯的产量及消费量逐年增加,其引发的环境问题及毒性危害正在引起人们的重视。在许多国家和地区,尤其是第三世界国家的青少年人群中甲苯是一种流行的吸入性滥用药物,已成为普遍关注的社会性问题。甲苯是相对分子质量小脂溶性的中枢神经系统抑制剂,容易通过血和脑屏障。目前研究表明,甲苯吸入后可快速吸收,迅速分布至大脑并立即作用于中枢神经系统细胞膜,从而影响脑内神经递质的合成、神经末梢的释放、重摄取和降解,导致一系列神经症状的发生,诱发神经毒性作用和奖赏(强化)效应。表现为认知、运动、平衡功能障碍和相关的生理、精神依赖性行为[1,2]。甲苯作为神经毒性物质和吸入性滥用药物,其神经损伤和成瘾的机制是什么,尚未清晰,本研究试图通过吸入甲苯对小鼠神经的行为学及形态学研究影响,探讨其神经毒性及成瘾性的效果和机制。第一部分甲苯不同浓度吸入昆明鼠的神经行为学及成瘾性观察实验方法比较甲苯不同浓度给药对昆明鼠学习记忆等神经行为学的影响,选择了1.21,2.42,4.84,9.68,19.36㎎/L 5个浓度下的甲苯每天染毒20min,连续5 d,应用神经行为学的方法,观测小鼠自主活动、空间学习记忆能力及条件性位置偏爱(CPP)的变化。实验结果吸入2.42,4.84㎎/L浓度甲苯的小鼠,自主活动次数与对照组比较,明显增加(P<0.05),而吸入19.36㎎/L浓度甲苯的小鼠,自主活动次数与对照组比较,明显减少(P<0.05);仅有吸入19.36㎎/L浓度组的小鼠,水迷宫潜伏期与对照组比较,明显延长(P<0.05),盲端数无明显变化。并且吸入2.42,4.84,9.68㎎/L浓度甲苯的小鼠,对甲苯产生了CPP(P<0.05)。第二部分甲苯不同浓度吸入昆明鼠成瘾性的年龄相关性改变观察实验方法比较甲苯不同浓度给药对不同年龄段昆明鼠奖赏效应的影响,按出生后时间(PND)分为PND21-25、PND31-35、PND41-45、PND56-60四个时间段,每组按染毒浓度随机分成组即2,5,10,20㎎/L四个浓度组,观测昆明鼠甲苯强化效应功能的青年期发展。实验结果PND25的幼年小鼠在甲苯浓度为5㎎/L时显示CPP,在其他浓度下无显著差异。而青春期小鼠则在5,10,20㎎/L(PND35)和2,5,10,20㎎/L(PND45)浓度下出现CPP,在其他浓度下无显著差异。PND60的成年小鼠在5,10㎎/L浓度下有显著的CPP,在其他浓度下无显著差异。第三部分甲苯对昆明鼠神经损伤和成瘾性的形态学研究方法空间学习记忆的神经行为学及成瘾性实验结果提示,甲苯吸入途径能明显改变自主活动、空间学习记忆能力及CPP。为观察神经行为学变化及成瘾性与神经递质的关系,通过免疫组织化学方法,研究甲苯对小鼠不同脑区的CHAT、GABA及Glu阳性细胞的时效变化关系,探讨其神经毒性及成瘾性的机制。结果CHAT阳性细胞主要分布在大脑皮层,1d各剂量组与未见明显变化,6d、14d阳性细胞明显减少。GABA表达弱,阳性细胞主要分布在大脑皮层和海马,1d各剂量组未见明显变化,6d、14d阳性细胞明显减少。Glu阳性细胞主要分布在大脑皮层,1d各剂量组与空气组比较未见明显变化,6d、14d阳性细胞明显减少。结论①发现高浓度甲苯吸入可明显降低小鼠的空间学习记忆功能。②中等浓度下甲苯可使小鼠对其产生精神依赖。③青春期是小鼠极易形成甲苯成瘾的重要年龄阶段。④动物的生长发育(尤其是神经系统的生长发育)与甲苯成瘾的敏感性有关。⑤神经毒性及成瘾性与皮层、海马ChAT、GLu等递质的改变有关。