【摘 要】
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目的:本研究目的是利用已建立的鼻咽癌的亲本细胞系及紫杉醇耐药细胞系,对课题组前期研究筛选出的信号分子(Lyn、UBC、 Ncaph2、IRAK3、Cu13)与FOLR1的相互作用进行验证,并初
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目的:本研究目的是利用已建立的鼻咽癌的亲本细胞系及紫杉醇耐药细胞系,对课题组前期研究筛选出的信号分子(Lyn、UBC、 Ncaph2、IRAK3、Cu13)与FOLR1的相互作用进行验证,并初步探讨目的蛋白与FOLR1可能的相互作用通路。方法:以免疫共沉淀及Western Blot方法验证体外培养的正常鼻咽上皮细胞NP69、三株鼻咽癌亲本细胞(CNE-1、HNE-2、5-8F)及紫杉醇耐药细胞(CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol、5-8F/Taxol)中FOLR1与Ly、UBC9、Ncaph2、IRAK3及Cu13是否存在相互作用。结果:1.以FOLR1抗体对鼻咽癌紫杉醇耐药细胞系CNE-1/Taxol、 HNE-2/Taxol以及5-8F/Taxol细胞总蛋白进行免疫共沉淀后,复合物中可以检测到Cul3、IRAK3以及Ncaph2的表达,但是无Lyn以及UBC9的表达,而阴性对照中5个抗体均无表达。2.以Cu13、IRAK3、 Ncaph2、Lyn以及UBC9抗体对鼻咽癌紫杉醇耐药细胞系CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol以及5-8F/Taxol细胞总蛋白进行免疫共沉淀后,Cul3、IRAK3以及Ncaph2沉淀的复合物中可以检测到FOLR1的表达,而Lyn及UBC9的复合物中未检测到FOLR1的表达,阴性对照NP69沉淀物中亦未检测到FOLR1的表达。结论:1.蛋白FOLR1与Cul3、IRAK3及Ncaph2在人鼻咽癌亲本细胞和鼻咽癌紫杉醇耐药细胞中均存在相互作用,而与Lyn及UBC9没有物理上的相互作用。2.Cu13、IRAK、Ncaph2、Lyn及UBC9在人永生化正常鼻咽上皮细胞、鼻咽癌亲本细胞及鼻咽癌紫杉醇耐药细胞中均有表达。
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