固定相优化液相色谱法(phase optimized liquid chromatography,POPLC)是采用五款具有不同选择性的单柱进行基础实验得到各个组分在不同柱上的保留信息,通过相关软件进行模拟,获得不同长度和不同类型色谱柱串联起来的分离模式,达到从固定相上优化高效液相色谱分离条件的新型色谱技术。　　 本论文研究工作由两部分组成,一是采用POPLC对创新药物雷公藤衍生物(T8)中有关物质快速检查及定量分析进行了研究；二是将POPLC应用于混合寡肽样品和替可克肽药物的分离分析中,建立了POPLC流动相梯度洗脱模式。　　 一、POPLC在创新药物雷公藤衍生物(T8)中的研究　　 雷公藤衍生物(T8)是雷公藤植物的活性成分-雷公藤甲素(triptolide,T2)5-位羟基化的结构修饰产物。雷公藤衍生物T8以及可能存在的有关物质水溶性都较差,而且相互间极性差别较大,所以在常规高效液相色谱(high performanceliquid chromatography,HPLC)分离条件的建立过程中,色谱柱选择较繁复,运行时间较长,后出峰的有关物质检测灵敏度较低。本研究内容考察POPLC在T8中有关物质的快速、有效分离和含量准确测定中的应用。结果表明在主峰T8和有关物质达到较好分离的前提下,与常规HPLC方法相比,POPLC的分析时间可缩短一半,最晚出峰的有关物质的检测灵敏度提高两倍,并且可以检测出更多的未知有关物质。通过方法学的考察,表明建立的POPLC方法灵敏、准确、重现性好,可用于T8中有关物质的质量控制。　　 二、POPLC在多肽药物分离分析中的应用研究　　 该部分包括两小部分:POPLC在混合寡肽分离中的应用研究以及在替可克肽药物分离中的应用研究。　　 1、POPLC在混合寡肽分离中的应用研究　　 含有13个寡肽的混合溶液包括了非对映异构体H-Ala-PheOH和H-Ala-D-PheOH,异构体Asp-PheOMe和β-Asp-PheOMe,以及与其他12个多肽组分间极性差别较大的Angiotensin。本文首次将流动相梯度洗脱应用到POPLC技术中实现对寡肽的分离。结果表明在POPLC的梯度洗脱的条件下可在30min内有效分离出13种寡肽成分。　　 2、POPLC在替可克肽药物分离中的应用研究　　 替可克肽为人工合成的24肽促皮质素类似物,其氨基酸序列为H-Ser-Tyr-Ser-Met-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys-Arg-Arg-Pro-Val-Lys-Val-Tyr-Pro-OH,可能存在tetracosactide sulfoxide 和16[D-Lys]-tetracosactide两个有关物质。本文将POPLC优化技术应用到替可克肽和有关物质的分离中。结果通过固定相优化,流动相优化,温度优化,成功地在35分钟内将替可克肽和两个已知有关物质有效分离,并检测出四个未知有关物质,解决了常规方法分析时间长,峰的对称性差的问题；并采用该方法对不同批号的样品进行了分析。