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黄花蒿因其药用价值一直受到广泛的关注,但与青蒿素产量相关基因的研究还有待深入,青蒿素与生物钟关系的研究尚属空白。地球自转导致植物内部节律变化,而节律变化与节律基因有关。光照、温度或其他外界环境因子可以对生物节律进行重调,改变节律相位,重新设定生物钟(Mcclung,2006)。本研究通过测定青蒿素及相关基因表达的日周期变化,筛选节律基因,分析低温对青蒿素合成及相关基因表达的影响,寻找对青蒿素合成正调节的基因,为探索黄花蒿节律规律,提高产量提供理论依据。本研究对青蒿素含量日周期变化进行测定,实验结果表明黄花蒿叶片青蒿素含量呈现日周期变化规律,上午8：00最低、下午14：00产量最高；而花中青蒿素没有明显规律,但每隔18h出现一次高峰；根部则没有检测到青蒿素。利用荧光定量PCR技术对20个青蒿素合成相关基因和4个节律基因进行分析。其中叶片ADS、ALDH1、CYP71AV1基因与青蒿素含量日周期变化同步,每天14：00出现高峰,8：00最低。ECS、SQS基因的变化规律与青蒿素日周期变化规律相反,最高峰在8：00,最低峰在14：00；而花中基因变化与青蒿素含量变化不同步。低温处理提高黄花蒿青蒿素含量,但低温处理后日周期节律消失；与常温相比,ALDH1基因的表达量整体下调,但表达规律并没有受到低温的影响,与常温时表达规律一致；低温下ADS和CYP71AV1基因变化规律与青蒿素含量变化规律同步。为了满足多样品同时提取检测的要求,本研究对比了真空浓缩法和旋转蒸发法提取青蒿素,结果表明两种方法在稳定性、精密度、重复性、加样回收率等方面差异不大,然而真空浓缩法步骤更简便、提取时间短,更符合本研究的要求。综上,黄花蒿叶片青蒿素呈24h节律变化；青蒿素合成途径中ADS、CYP71AV1、ALDH1基因既是黄花蒿节律基因,又与青蒿素合成密切相关,但ADS、CYP71AV1受温度调节而ALDH1对低温不敏感。