河蟹气单胞菌控制与醉制食品安全研究

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本文通过对河蟹致病性气单胞菌风险分析、河蟹气单胞菌的控制技术及醉蟹及相关产品加工的质量控制的探讨,目的在于更好的保证河蟹、醉蟹及其相关产品的饮食安全,为这类产品的生产实践提供依据。   取患病河蟹肌肉作菌群分析。以绵羊血营养琼脂平板作细菌形态观察,以中国科学院微生物研究所提供的标准株为参考,对菌株进行鉴定,用无菌M1培养基稀释代表性菌株并以普通营养琼脂计数,结果表明:分离得到的10株细菌,菌落均呈圆形、边缘整齐、稍凸起、灰褐色、湿润、有光泽、中等大小,直径为2~3mm,形成透明的β-溶血圈,菌体两端钝圆,大小为0.85~4.4μm,成单或成双排列,无荚膜和芽孢,均为气单胞菌属嗜温有动力群,包括3个生物种,即温和气单胞菌(A.sobria)、嗜水气单胞菌(A.hydrophila)和豚鼠气单胞菌(A.caviac),其中A.sobria占50%,A.hydrophila占40%,A.caviac占10%;在4~42℃温度范围内,细菌数在25℃24h最高,在42℃48h最低,嗜温气单胞菌生长的温度范围为4~37℃,而25~30℃是最适生长温度。   以倾注平皿法测定Sx2-肌株、Y905-2株、P50419-1株和Y1021-1-2株的M1培养基的细菌数,以Sx2-肌株、Y905-2株、P50419-1株和Y1021-1-2株的M1培养基稀释作鲫鱼毒力试验、小白鼠毒力试验,以Sx2-肌、Y905-2株和P50419-1株的M2培养基作溶血性外毒素检测,以Y905-2株和P50419-1的M2培养基作细胞毒性试验,以Y905-2株和P50419-1株提纯的毒素作兔肠结扎试验。结果表明:在培养基和试验条件相同下,温和气单胞菌每毫升所含的细菌数虽然略低于嗜水气单胞菌,但它对鲫鱼和小白鼠的半数致死量约高102和101,溶血价也高23,溶血性外毒素有三条蛋白条带,多一条20kd蛋白条带。温和气单胞菌、嗜水气单胞菌是有致病力,而且温和气单胞菌的毒力比嗜水气单胞菌强。   以受试菌株(温和气单胞菌SX2-肌,嗜水气单胞菌TC7041,豚鼠气单胞菌Y1011-1)的M1培养物测定细菌数后,分别置于65℃水浴锅、90℃水浴锅、50%食醋、33%加饭酒中,作用一段时间后,统计杀菌率;以受试菌株的M1培养物测定细菌数后,腹腔注射健活鲫鱼,作烹调试验后统计杀菌率;以受试菌株的M1培养物测定细菌数后,在杀菌剂(ClO2、乙酸钠)和加饭酒的不同浓度、时间、温度影响下,统计杀菌率。结果表明:经65℃15min或经90℃1min处理可彻底灭菌,50%食醋最高杀菌率为为100%,33%加饭酒杀菌率为90%~96%不等,杀菌剂最佳作用浓度、时间、温度分别是100%、1.5~2h、10℃,50%加饭酒浓度对气单胞菌基本无作用,40%杀菌剂与加饭酒联合作用1h,即可对气单胞菌的M1培养物彻底灭活。   通过对市售醉蟹经2~8 kGy辐照后,进行微生物检测、营养成分(氨基酸)监测,采用双盲法对样品色泽、形态、气味、滋味等进行观察、品尝鉴定,分室内常温和低温(0~5℃)冷藏。结果表明:所有样品的大肠菌群均在30MPN/100g以下,沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌均未检出,醉蟹经辐照处理后,除蛋氨酸含量略高于对照外,其余氨基酸含量均稍低于对照,在室内常温下贮藏,保质期可由3个月延长到6个月,在低温(0~5℃)下贮藏,保质期可延至9个月。   按传统醉制食品的配方制备醉蟹、醉螃蜞、醉虾、醉蚶,采用平板记数法对不同部位分别统计细菌数,向配方中添加50%、100%、200%三种浓度杀菌剂,序时观察细菌数变化,统计杀菌率。结果表明:自制醉制样品6d后出现严重腐败,100%杀菌剂使用18d的杀菌率为100%。
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