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目的:1.研究Aurora蛋白激酶抑制剂VX-680对肝癌细胞HepG2增殖、凋亡、粘附、迁移和血管形成的影响。2.探讨VX-680抑制HepG2细胞恶性表型的分子机制。方法:1.通过MTT、平板克隆形成实验、DAPI染色、细胞-细胞间粘附实验和细胞-细胞外基质粘附实验、划痕实验以及小管形成实验观察不同浓度(0μmol/L,3.125μmol/L,6.25μmol/L,12.5μmol/L)的VX-680对HepG2细胞增殖、凋亡、粘附、迁移及小管形成的影响。2.用不同浓度的VX-680处理HepG2细胞后,Western blot检测凋亡分子:Caspase-3和PARP,粘附分子:E-cadherin和CD44,转移相关分子MMP-2及血管相关因子VEGFA的表达水平。3.用不同浓度梯度的VX-680处理HepG2细胞后,Western blot检测VX-680对ERK和AKT信号通路的影响。结果:1.用不同浓度梯度的VX-680处理HepG2后,MTT实验和克隆形成实验显示,相比于对照组,实验组HepG2细胞的增殖速率降低,细胞克隆形成数明显减少,并且随着VX-680浓度的升高,各组细胞的增殖抑制率增加(P<0.05),细胞克隆形成率逐渐下降(P<0.05)。DAPI染色实验结果显示,细胞发生核浓缩、核碎裂的比例逐渐增多(P<0.001)。细胞-细胞间粘附实验以及细胞-细胞外基质粘附实验结果显示,细胞聚集形成的细胞团块越来越大(P<0.001),细胞越来越不容易被分散为单个(P<0.001),细胞与三种外基质(FN,多聚赖氨酸,明胶)的粘附性逐渐降低(P<0.05)。划痕实验显示,VX-680处理组细胞的迁移速度减慢(P<0.001)。小管形成实验显示,HUVEC细胞的小管形成数逐渐减少(P<0.001)。2.Western blot结果显示,用不同浓度的VX-680作用HepG2后,细胞中凋亡分子Caspase-3酶原和PARP的表达水平逐渐降低,并且随着VX-680浓度的升高,PARP的剪切带越来越明显,粘附分子E-cadherin表达水平逐渐升高,CD44的表达逐渐下调,转移相关分子MMP-2表达减弱,VEGFA表达水平明显降低。3.Western blot结果显示:随着VX-680浓度梯度的升高,ERK和AKT信号通路中p-ERK和p-AKT的表达水平逐渐降低,而总蛋白ERK和AKT未发生显著改变。结论:1.Aurora蛋白激酶抑制剂VX-680能够通过时间-浓度依赖性的方式抑制HepG2细胞的增殖,促进细胞凋亡,增加细胞-细胞间的同质粘附能力,降低细胞-细胞外基质的粘附性,抑制迁移,减弱HUVEC的血管生成能力。2.VX-680通过调控Caspase-3及PARP的活化促进肝癌细胞凋亡;VX-680通过增加E-cadherin,降低CD44及MMP-2的表达可以增加细胞-细胞间的同质粘附能力,降低细胞-细胞外基质的粘附性及迁移能力,通过下调HepG2细胞中VEGFA的表达可以减弱HUVEC细胞的血管生成能力。3.VX-680可能通过抑制AKT和ERK信号通路而抑制HepG2细胞的恶性表型。