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背景和目的近十余年，我国城镇人口由于生活习惯及饮食结构等因素的改变，动脉粥样硬化的发病率明显增加，其引起的心脑血管疾病已逐步上升为国人死亡的主要原因。虽然血管搭桥术及经皮血管成型术等取得了令人嘱目的成就，但是术后血管及吻合口的内膜增生，使远期通畅率常不能令人满意，使患者不能受益于这些治疗。基因治疗被视为未来从根本上解决血管病变的方法之一，高效、安全的载体系统是基因治疗的基本条件之一。纳米载体体积极小，穿透性高，甚至可以穿透整个血管壁；纳米载体多由可生物降解的有机材料制备，生物相容性好，无毒或低毒；纳米颗粒的包裹对基因有很好的保护作用。聚乳酸聚乙醇酸共聚物（PLGA）既是一种已被美国食品及药品管理局（FDA）批准的可生物降解的纳米材料，国际上已将其成功用于基因转染的研究。肾素-血管紧张素-醛固酮系统调节水盐代谢、血管张力和交感神经系统活性，血管紧张素II是其中最主要的效应肽，是血管病理生理学的重要介质。AngII必需通过其受体发挥作用，主要分布于血管平滑肌细胞（VSMC）上的I型AngII受体（AT1R），介导AngII的绝大多数生物学作用。所以AT1R基因理所当然成了动脉粥样硬化研究的重要侯选基因。近年来，Dzau, V.J在哈佛大学的实验室首先分离克隆出的AngII的1型受体相关蛋白即是一种重要的极具前景的靶基因。本实验拟于在大鼠血管损伤模型及大鼠离体VSMC上，通过纳米载体介导的基因转染的方法，评价纳米粒子携带ATRAP基因质粒转染的效率及可行性。论证纳米粒子介导的ATRAP在VSMC凋亡及抑制血管内膜增生的作用及其细胞分子机制。材料和方法本实验应用聚乳酸聚乙醇酸共聚物（PLGA）和聚乙烯醇(PVA)包载ATRAP基因质粒，制备纳米级粒子混合物，通过纳米粒子介导的基因转染的方法，将其转染至大鼠离体VSMC及大鼠颈血管损伤模型上。方法：1、纳米粒子-ATRAP基因转染体系的构建：PLGA和PVA包载ATRAP基因质粒，检测并进一步改善其粒度及体内外转染率。2、体外部分：利用纳米粒子介导的ATRAP转染的VSMC，观察ATRAP的细胞毒性及其在体外对VSMC增殖的抑制作用和对凋亡的促进作用。3、体内部分：在被气囊导管损伤后的大鼠颈动脉局部转染纳米粒子介导的ATRAP，论证其在体内对VSMC增殖的抑制作用和凋亡的促进作用。结果1、PLGA介导的ATRAP有较好的稳定性，释放时间约为10-14天，无明显细胞毒性。2、大鼠血管内膜及中膜可以观察到纳米粒子介导的ATRAP的mRNA及其蛋白产物的表达。3、在AngII刺激VSMCs48小时后，ATRAP过表达可以抑制AngII诱导的3H胸腺嘧啶核苷的合成。4、ATRAP的过表达使磷酸化ERK的活性显著降低并明显抑制了损伤动脉的新生内膜增生。5、ATRAP对于血管平滑肌细胞增殖的抑制作用是通过AT1受体介导ERK的激活实现的。结论1、AT1受体介导的ERK活性在AngII调节的VSMCs增殖中起重要作用。2、实验证明ATRAP明显抑制了AT1R介导的VSMC的增生及血管炎症反应。3、被pcDNA3载体介导的ATRAP可以抑制VSMC的增殖及血管内膜增生。