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目的:大量研究表明,慢性间歇性低压低氧(Chronic intermittent hypobaric hypoxia, CIHH)具有明显的心脏保护作用,可增强心脏对缺血、缺氧的耐受性,减轻缺血/再灌注对心肌的损伤,促进缺血/再灌注后心脏舒缩功能的恢复,以及抗心律失常。有研究报道,CIHH可改变机体对某些药物的反应性,从而间接发挥作用。Anandamide(AEA)是一种内源性大麻素物质,具有抗心肌缺血、抗心律失常等心脏保护作用。但不知CIHH对AEA心脏保护作用有何影响。本研究旨在利用大鼠离体心脏缺血/再灌模型,观察CIHH对AEA抗心肌缺血/再灌损伤保护作用的影响,并探讨其机制。方法:雄性成年Sprague-Dawlay(SD)大鼠随机分为5组:间歇性低氧14天组(CIHH14)、间歇性低氧28天组(CIHH28)、anandamide组(AEA)、间歇性低氧14天加AEA组(CIHH14+AEA)和对照组(CON)。CIHH组和CIHH+AEA大鼠置于低压氧舱,分别接受14天、28天模拟5000米海拔高度(PB=404 mmHg, PO2=84 mmHg)的低氧处理,每天6小时。AEA和CON组大鼠除了不接受低氧处理外,其它处理均与间歇性低氧组动物相同。大鼠麻醉固定,迅速开胸,取出心脏,应用Langendorff离体心脏灌流装置制备心肌缺血/再灌注模型,即首先稳定灌流30 min,停灌30 min(缺血),然后复灌60 min(再灌注)。将液体小囊插入左心室,室内压力通过压力换能器输入记录系统,分别描记离体大鼠心脏基础状态和缺血/再灌注状态下不同时间的心脏功能的变化。心功能指标包括:左室发展压(left ventricular systolic pressure, LVDP)、左室舒张末压(left ventricular end diastolic pressure, LVEDP)和左室压力最大变化速率(maximal positive and negative velocity of left ventrichlar pressure,±LVdp/dtmax)。对离体大鼠心脏,分别在缺血前给予不同的药物干预。⑴对AEA和CIHH14+AEA组大鼠离体心脏,在缺血前给予10 min的AEA(2 nM)预处理;⑵对部分CIHH14+AEA大鼠离体心脏,在给AEA前分别给予10 min的AEA CB2受体阻断剂AM630(10 nM)和CB1受体阻断剂AM251(10 nM)预处理;⑶对部分CON大鼠离体心脏在缺血前分别给予10 min的AM630(10 nM)和AM251(10 nM)预处理。实验过程中,留取各监测时间点心脏灌流漏出液(冠脉流量),利用分光光度计按照乳酸脱氢酶试剂盒方法测定其中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)含量。实验结束后,取下心脏,置于液氮中冰冻保存。通过黄嘌呤氧化酶法方法,测定左心室心肌中超氧化物岐化酶(superoxide dismudase, SOD)活力,通过硫代巴比妥酸法计算出丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量。结果:⑴基础状态下,CIHH14、CIHH28、AEA、CIHH14+AEA和CON大鼠的LVDP分别为132.1±9.7、132.0±12.8、135.5±8.6、131.6±8.5和132.2±11.0;LVEDP分别为5.5±2.9、5.6±1.8、7.8±5.7、5.8±3.3和5.7±2.6;+LVdp/dtmax分别为3606.4±97.1、3616.8±109.2、3610.3±116.8、3586.6±90.4和3617.3±97.9 ; -LVdp/dtmax分别为2536.4±87.9、2612.0±46.4、2498.4±96.4、2480.4±63.0和2500.4±80.4,各组心功能参数间均无明显差异(P>0.05)。⑵缺血后、再灌注60 min时,CIHH28和CIHH14+AEA大鼠的LVDP恢复分别为52.7±6.5%和53.1±8.5%,两者间无显著差异(P>0.05),但明显好于CIHH14大鼠的11.2±5.9%、AEA大鼠的8.9±5.3%和CON大鼠的10.4±4.0%(P<0.01);LVEDP的恢复在CIHH28和CIHH14+AEA大鼠分别为48.3±12.3%和42.1±11.5%,两者间无显著差异(P>0.05),但明显好于CIHH14大鼠的14.5±10.2%、AEA大鼠的15.7±9.7%和CON大鼠的15.6±9.1%(P<0.05);+LVdp/dtmax的恢复在CIHH28和CIHH14+AEA大鼠分别为38.1±2.2%和38.2±2.4%,两者间无显著差异(P>0.05),但明显好于CIHH14大鼠的8.6±1.5%、AEA大鼠的8.3%±1.1%和CON大鼠的8.5±1.5%(P<0.05);-LVdp/dtmax的恢复在CIHH28和CIHH14+AEA大鼠分别为41.8±2.4%和40.5±1.3%,两者间无显著差异(P>0.05),但明显好于CIHH14大鼠的11.2±1.7%、AEA大鼠的11.5±2.1%和CON大鼠的10.7±1.3% (P<0.05)。⑶缺血/再灌注后60 min时,CIHH28和CIHH14+AEA大鼠冠脉流出液中的LDH分别为49.3±6.5和40.9±5.2,两者间无明显差异(P>0.05),但明显低于CIHH14、AEA和CON大鼠的93.7±6.4、110.2±8.0和101.6±8.0(P<0.05);心肌组织中SOD在CIHH28和CIHH14+AEA大鼠分别为229.7±6.7和239.3±6.2,两者间无明显差异(P>0.05),但明显高于CIHH14、AEA和CON大鼠的160.2±6.7、170.7±7.3和181.9±4.4(P<0.05);MDA在CIHH28和CIHH14+AEA大鼠分别为1.8±0.1和1.3±0.1,两者间无明显差异(P>0.05),但明显低于CIHH14、AEA和CON大鼠的2.1±0.1、2.0±0.1和2.2±0.1(P<0.05)。⑷CB1受体阻断剂AM251和CB2受体阻断剂AM630对CON大鼠的心功能无影响。AM630可明显抑制CIHH14+AEA大鼠心脏缺血后左心室功能的恢复,使LVDP、LVEDP和±LVdp/dtmax恢复率明显降低;同时冠脉流出液LDH升高,心肌组织SOD活性降低、MDA升高。而AM251无此作用。结论:⑴28天CIHH处理具有明显的心脏保护作用,可促进大鼠缺血/再灌注后心功能的恢复,降低冠脉流出液中的LDH含量,增加心肌组织SOD活性和降低心肌组织MDA含量。⑵14天CIHH处理和低浓度AEA对心脏均无明显保护作用,但14天CIHH可增强AEA抗心肌缺血/再灌注损伤的心脏保护作用,促进缺血/再灌注后心功能的恢复,降低冠脉流出液中LDH含量,增加心肌组织SOD活性和降低心肌组织MDA含量。⑶CIHH对AEA的加强作用可被CB2受体阻断剂AM630所阻断。提示CIHH促进AEA的心脏保护作用可能由CB2受体所介导。