吴茱萸碱对胃癌SGC-7901细胞生长抑制及凋亡诱导作用的研究

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目的:研究吴茱萸碱对胃癌 SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响,并探讨相关的作用机制,从而为吴茱萸碱的抗癌作用提供进一步的实验依据,为其开发成为临床癌症治疗中的一种新型药物提供理论基础。  方法:体外培养人胃癌SGC-7901细胞,1.5μmol/l吴茱萸碱作用于SGC-7901细胞12h、24h、36h、48h后:①倒置显微镜和荧光显微镜下观察细胞形态学的变化。②PI单染流式细胞术检测细胞周期分布情况。③Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡情况。④采用 caspase活性测定试剂盒检测细胞中caspase3、caspase8和caspase9的活性。⑤Western Blot检测细胞中 caspase3、caspase8、caspase9、Bax、Bcl-2的表达情况。  结果:①倒置显微镜和荧光显微镜下观察,经吴茱萸碱作用的胃癌SGC-7901细胞表现出典型的细胞凋亡形态学特征。②PI单染结果显示,吴茱萸碱影响了胃癌SGC-7901细胞周期分布,使细胞周期阻滞于G2/M期。③Annexin V-FITC/PI双染结果显示,吴茱萸碱诱导了胃癌SGC-7901细胞凋亡。④比色法检测caspase活性结果显示,吴茱萸碱作用24h、36h后,胃癌 SGC-7901细胞中 caspase3、caspase8和caspase9的活性均增高。⑤Western Blot检测结果显示,吴茱萸碱作用24h、36h,胃癌SGC-7901细胞中caspase3、 caspase8、caspase9和bax的表达量均增加。吴茱萸碱作用12h、24h时,bcl-2的表达量增加;吴茱萸碱作用36h、48h时,bcl-2的表达量降低。  结论:吴茱萸碱通过使细胞周期阻滞于 G2/M期抑制了胃癌 SGC-7901细胞的增殖,同时当吴茱萸碱作用一定时间后,可引起caspase3、caspase8和caspase9活性的增强,增加caspase3、caspase8和caspase9的蛋白表达,增加bax的蛋白表达,降低bcl-2的蛋白表达从而诱导了胃癌SGC-7901细胞的凋亡。
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