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目的为了制备出疗效更好、服用更方便、更符合现代标准的中成药,我们对赤丹丸(Chi dan pill CDP)的提取工艺进行优化改进,并对应用优化工艺提取的物质进行药效学研究,为赤丹丸的进一步研究提供理论依据。方法一、提取工艺采用L9(34)正交水平表进行试验,以提取物中芍药苷、丹参酮ⅡA的含量为考察指标,考察乙醇浓度(A)、溶剂(乙醇、水)用量倍数(B)、提取时间(C)三种因素对提取结果的影响,从而筛选出最佳的工艺条件。二、芍药苷、丹参酮ⅡA含量的测定—反相高效液相法1、芍药苷含量测定的方法色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18(4.6×150 mm,5μm)柱,以乙腈-水-磷酸(17:83:0.1)为流动相,流速为1ml·min-1,检测波长230nm,柱温为30℃。2、丹参酮ⅡA的测定方法色谱柱为Agilent EclipseXDB-C18(4.6×150mm,5μm)柱,流动相组成为水-甲醇(25:75),流速为1ml·min-1,检测波长为270nm,柱温为25℃。三、药效学试验赤丹丸提取物(Optimum extract of chidan pill OECDP)对慢性盆腔炎模型大鼠的作用。采用苯酚胶浆致炎剂诱导的慢性盆腔炎模型大鼠,将模型大鼠分为OECDP大剂量组、中剂量组、小剂量组、CDP组、正常组、模型组、妇炎康组。光镜下观察大鼠子宫的组织学形态,放免法测定血清中白细胞介素Ⅱ(IL-2)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,测定全血的血液流变学,观察有关各项指标的变化。初步探讨OECDP对CPID的作用机制。观察对小鼠耳廓肿胀和大鼠足肿胀炎症模型的影响,考察其抗炎作用;对小鼠热板法和醋酸扭体法所致动物疼痛反应的抑制作用,考察其镇痛作用;通过小鼠耳廓毛细血管的变化,考察其对微循环的作用。结果一、建立了赤丹丸的最佳提取工艺采用8倍量的75%乙醇回流1.5h,然后用10倍量的水再回流1.5h。通过此工艺得到的提取物中芍药苷、丹参酮ⅡA含量最高。二、药效学试验表明该提取物能够降低小鼠的痛阈,减少小鼠的扭体次数;能减轻耳、足肿胀的程度;能够增加小鼠耳廓毛细血管的开放数量,扩张末梢动静脉的口径;能改善模型大鼠的血液流变学,缓解宫腔粘连闭塞或扩张,减轻子宫组织中炎细胞的浸润,纤维结缔组织的增生,治疗组较模型组,IL-2水平显著升高,TNF-a水平有所降低。结论1、采用8倍量的75%乙醇回流1.5h,然后用10倍量的水再回流1.5h。此工艺得到的提取物中有效成分含量高、稳定、重现性好。2、OECDP有明显的抗炎、镇痛和改善微循环的作用;并对慢性盆腔炎有治疗作用;OECDP的疗效强于CDP。