目的探讨逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)在脊柱结核临床诊治中的应用价值,分析结核分枝杆菌在脊柱结核病灶不同病变组织中存在情况,从病原学角度出发探讨脊柱结核手术病灶切除范围,从而为脊柱结核病的临床诊断、治疗提供帮助。方法33例脊柱结核患者按病椎骨有无硬化分为硬化组和非硬化组,手术中取硬化组的病灶硬化壁、硬化壁外“亚正常骨”以及两组患者的干酪样坏死组织和“亚正常骨”,采用RT-PCR法扩增上述样本的85BmRNA并逆转录生成cDNA;结果干酪样坏死组织、硬化骨组织、亚正常骨组织85BmRNA基因扩增,检测阳性率分别75.6%(25/33)、64%(16/25)、30.3%(10/33),平均报告时间:2天;结论(1)逆转录聚合酶链反应检测脊柱结核病灶中结核分枝杆菌,具有快速、灵敏、特异性高等特点;(2)从细菌学角度,成功运用分子生物学方法研究、分析脊柱结核病灶中不同病变组织(尤其是硬化骨组织)的结核分枝杆菌存在、存活情况;(3)脊柱结核病灶硬化壁中存留具有生物活性的结核菌,手术彻底切除后有利于预防术后结核复发。(4)亚正常骨组织中有具有生物活性的结核分枝杆菌,检出阳性率较低,手术中应根据具体情况结合影像资料判断切除范围,以免影响术后脊柱稳定性。