第一部分基于调强的术前同步放化疗+手术治疗胸段食管鳞癌的疗效分析研究目的:术前同步放化疗(NCRT)+手术治疗已经成为可手术食管癌患者的推荐治疗模式。目前已有多项循证医学证据支持这一推荐,但回顾这些证据,我们发现大部分研究基于常规放疗手段,而非基于现代调强放射治疗(IMRT)。因此,本研究旨在分析利用IMRT行术前同步放化疗联合手术的综合治疗胸段食管鳞癌的疗效及预后。材料与方法:收集2009年1月1日至2016年5月31日之间在中国医学科学院肿瘤医院接受治疗的胸段食管癌患者,经组织病理学证实为鳞癌,治疗方式为NCRT +手术治疗。手术前分期及手术后分期分别采用UICC 2002和UICC 2010。放疗射线采用6MV-X线,放疗技术选用IMRT,单次剂量为常规分割剂量(1.8Gy/2.0Gy)。同步化疗采用5-FU或紫杉类为主的方案。放化疗不良反应根据RTOG/EORTC急性放射性损伤分级标准进行评级。采用Kaplan-Meier法行生存分析,Logrank法单因素预后分析,Cox比例风险模型行多因素分析,以p<0.05为有统计学差异。研究结果:全组共84例患者。中位年龄57.5岁(28岁-71岁)。大部分患者(73例,86.9%)在治疗前进行了超声内镜检查。疗前分期以Ⅲ期为主,疗前Ⅱ期和Ⅲ期患者分别为16例和68例,分别占19.0%和81.0%。全组患者中位放疗剂量为40Gy(38Gy-54Gy)。手术R0切除率高达96.4%,pCR率为33.3%,且有89.3%的患者达到病理降期。治疗不良反应方面,全组无Ⅳ度毒性反应,Ⅲ度骨髓抑制和Ⅲ度放射性食管炎分别占9.5%和3.6%。13例(15.5%)患者出现术后并发症,3例患者因术后并发症死亡,其中2例死于吻合口瘘,1例死于术后出血。全组中位随访21个月(2.7月-75.2月)。1年、3年、5年总生存(OS)分别为90.3%、63.6%、49.2%;1年、3年、5年无病生存(DFS)分别为70.1%、55.5%和47.0%;1年、3年、5年无局部区域复发生存(LRFS)分别为78.8%、55.6%和46.7%;1年、3年、5年无远处转移生存(DMFS)分别为77.3%、60.0%、50.8%。单因素分析显示疗前Ⅱ期(p=0.025)、R0切除(p=0.025)、降期(p=0.022)、肿瘤反应好(重度治疗反应p=0.021、pN0p=0.036、T/NpCRp=0.029)是总生存的预后良好因素。多因素分析结果显示仅术前分期(HR=0.220;95%CI 0.051-0.940;p=0.041)是独立预后不良因素。研究结论:胸段食管鳞癌术前同步放化疗+手术可获得高R0切除率、降期率及pCR率,且耐受性较好,疗前分期、是否降期、肿瘤反应情况、淋巴结转移情况及切除情况是影响预后因素,其中疗前分期是独立预后因素。第二部分miR-H1抑制食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的生物学研究研究目的:我国是食管癌的高发地区,约50%食管癌发生在我国,且我国食管癌具有一定特殊性,90%以上病理类型为鳞癌。近年,食管癌的诊断和治疗水平虽不断提高,但食管鳞癌的治疗疗效仍较差。结合我国食管癌的特殊性,深入研究食管鳞癌的分子标志物具有重要价值。miRNA在肿瘤的生物学调节方面起到重要作用,且已有研究表明miRNA与食管鳞癌的发生发展密切相关,且在我们的前期研究中发现miR-H1与预后相关,呈现抑癌作用。故本研究旨在进一步探讨miR-H1对食管鳞癌的生物学调节作用及机制。材料与方法:本实验首先通过real-time PCR测得7种食管鳞癌细胞及食管正常上皮细胞中miR-H1的表达水平。通过瞬时转染使得食管鳞癌细胞高表达或低表达miR-H1,通过慢病毒感染技术获得稳定高表达miR-H1组和对照组食管鳞癌细胞。通过MTS法研究miR-H1对食管鳞癌细胞增殖能力的影响,通过Transwell法研究miR-H1对食管鳞癌细胞迁移和侵袭能力的影响。之后通过生物学软件预测miR-H1的靶基因,通过real-time PCR及Western Blot实验分别从mRNA及蛋白水平研究miR-H1与靶基因的相关性,再利用瞬时共转染技术获取相应食管鳞癌细胞进行表型回补实验及双荧光酶报告基因实验对靶基因进一步验证。对4-6周龄的NU/NU裸鼠进行不同miR-H1表达食管鳞癌细胞皮下注射或尾静脉注射,对肿瘤体积以及肺转移情况进行观察。研究结果:在大多数食管鳞癌细胞中,相对食管正常上皮细胞,miR-H1呈现低表达状态。通过瞬时转染可以获得miR-H1高表达、miR-H1敲降及其对照组食管鳞癌细胞。与对照组细胞相比,miR-H1高表达能够抑制食管鳞癌细胞的增殖能力。瞬时及稳定高表达miR-H1均能够显著抑制食管鳞癌细胞的迁移和侵袭能力,而瞬时敲降miR-H1则能够显著促进食管鳞癌细胞的迁移和侵袭。通过生物学软件预测,FMR1为miR-H1的潜在靶基因。在蛋白水平,FMR1编码的蛋白FMRP与miR-H1表达呈负相关,且在mRNA水平,FMR1 mRNA亦与miR-H1表达呈负相关。通过双荧光酶报告基因实验发现,miR-H1能够直接结合在FMR1的3’UTR区域。通过miR-H1 mimic和FMR1共转染后,与对照组相比,miR-H1对食管鳞癌的增殖、迁移和侵袭能力的影响得以恢复。在体内,使用稳定高表达miR-H1的食管鳞癌细胞系及对照组对裸鼠进行皮下移植瘤和尾静脉注射的实验,其结果表明miR-H1在体内仍能抑制食管鳞癌细胞的增殖和转移能力。研究结论:食管鳞癌细胞的miR-H1呈现低表达状态,且miR-H1可以抑制食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,且这一调节能力的实现有赖于miR-H1靶向结合其靶基因FMR1。miR-H1在食管鳞癌中的具体调节机制以及与临床病理指标、预后和预测疗效等方面的相关性值得深入研究。第三部分混合型小细胞肺癌术后放疗价值探讨研究目的:混合型小细胞肺癌(C-SCLC)由小细胞肺癌(SCLC)与非小细胞肺癌(NSCLC)成分混合而成。无论是SCLC还是NSCLC,术后放疗均具有重要价值。但目前缺乏关于C-SCLC术后放疗的研究。本研究旨在探究C-SCLC术后放疗的价值及寻找可能从中获益的亚组。材料与方法:回顾性分析2004年1月-2012年12月收治的接受根治性手术治疗的经术后病理证实的混合型小细胞肺癌病例。采用Kaplan-Meier法行生存分析,包括总生存(OS)、无病生存(DFS)、无局部区域复发生存(LRFS)和无远处转移生存(DMFS),以p<0.05作为有统计学差异。研究结果:全组共55例患者。全组中位随访56.4个月,中位OS、DFS、LRFS及DMFS分别为62.2个月、43.4个月、54.9个月和43.4个月。1、3、5年OS分别为86.6%、62.6%和50.2%。术后放疗组和未术后放疗组的中位OS分别为54.9个月和62.2 个月。两组 1、3、5 年 OS 分别为 92.9%、69.6%、48.8%和 84.4%、60.1%、50.4%,组间无统计学差异(p=0.605)。两组DFS、LRFS和DMFS亦无统计学差异(p=0.466、p=0.455和p=0.544)。但在亚组分析中,术后放疗可以显著提高Ⅲ期、术后N2和转移淋巴结比例>10%患者的生存。对于Ⅲ期患者,术后放疗组的5年OS、DFS、LRFS和DMFS分别为61.0%、53.3%、61.0%和53.3%,未术后放疗组分别为13.4%、13.8%、13.7%和 13.6%,差异均具有统计学意义(p=0.015、0.026、0.008、0.030)。对于术后N2患者,术后放疗组5年OS、DFS、LRFS和DMFS分别为72.9%、62.5%、72.9%和62.5%,未术后放疗组分别为11.1%、11.4%、11.4%和11.1%,差异亦均具有统计学意义(p=0.018、0.032、0.008、0.042)。对于转移淋巴结比例>10%患者,术后放疗亦显著提高患者生存(OS:p=0.033;DFS:p=0.030;LRFS:p=0.025;DMFS:p=0.031)。对于清扫淋巴结个数>17个的患者,术后放疗显著提高OS(p=0.045)和 LRFS(p=0.048),未显著提高 DFS(p=0.109)和 DMFS(p=0.121)。研究结论:在接受根治性手术的C-SCLC中,术后放疗可以显著提高术后Ⅲ期及N2患者生存。对于转移淋巴结比例较大的患者,术后放疗亦可提高生存。