开放式压力控制培养系统下压力对人眼小梁细胞自分泌转化生长因子-β<,2>的影响

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【目的】采用自行设计组装的新型细胞培养加压实验模型――开放式压力控制培养系统,研究压力作用水平及作用时间对体外培养的人眼小梁细胞自分泌转化生长因子-β2(transforming growth factor-beta2,TGF-β2)的影响,并且探讨TGF-β2在原发开角型青光眼发病机制中的影响。【方法】采用组织块培养法体外培养人眼小梁细胞,传代至第5代用于本实验。根据动态循环气体控制压力的原理对细胞加压,对照组细胞不施加压力(0 mmHg),实验组细胞分别施加20、40、60和80 mmHg压力,各组细胞在不同压力水平下分别于开放式压力控制系统中持续培养0、12、24、36 h。采用双抗体夹心酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法测定各组细胞培养基上清液中TGF-β2浓度。【结果】实验组小梁细胞自分泌TGF-β2水平随压力增高而增高,与对照组比较,差异有显著性意义(P <0.05);在20~60 mmHg压力范围内,加压培养持续时间越长,TGF-β2水平升高越明显(P <0.05),其中40 mmHg压力水平下培养36 h组的小梁细胞分泌TGF-β2水平最高(1305.36±105.33 pg·ml-1);虽然在80 mmHg压力水平下,TGF-β2水平升高幅度下降,但加压培养12和24 h组细胞分泌的TGF-β2水平仍明显高于对照组(P <0.05)。【结论】在开放式压力控制培养系统中,随着压力水平的增高,在细胞可耐受范围内,小梁细胞自分泌TGF-β2水平增高,压力水平高低和作用时间长短影响TGF-β2水平的变化幅度。推测由于TGF-β2分泌水平异常,从而发挥的一系列病理生理功能可能是原发开角型青光眼病理进展中的重要机制之一。
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