本研究分四个部分探讨急性放射损伤医学应急救治的一些关键生物技术,主要包括急性放射损伤发生的分子生物学机制的实验研究和从分子水平开展放射生物剂量估算的研究。简介如下:第一部分脐带血AC133+细胞的放射生物学特性的实验研究目的探讨脐带血AC133+细胞的放射生物学特性,寻找可靠、有效的分离纯化以及高效、稳定的扩增脐带血AC133+细胞的方法,阐释其迁移、归巢的机制及一些细胞因子组合对受照脐带血AC133+细胞的放射损伤保护作用,为脐带血的临床应用新途径提供实验依据。方法采用以分子生物学手段为主的多种技术手段从多个角度来研究脐带血ACl33+细胞的放射生物学的特性。采用MACS?免疫磁珠活性分选系统分离、纯化脐带血ACl33+细胞,使用流式细胞仪测定ACl33+细胞的纯度以及不同细胞因子组合的体外扩效率;采用双色直接免疫荧光标记法,使用流式细胞仪测定新鲜分离的以及在体外不同培养条件下培养的脐带血ACl33+细胞表面CXCR4、CD49d、CD11a和CD62L的表达情况;采用免疫标记法,使用流式细胞仪测定受到2.5Gy 6 MV-X射线照射的脐带血ACl33+细胞加入细胞因子组合(IL-3+FL+SCF)后的细胞周期及早期凋亡情况的变化,研究其对受照脐带血AC133+细胞的“救治作用”。结果1、MACS?免疫磁珠分选系统分离、纯化脐带血AC133+细胞具有方法稳定可靠、纯度高的特点,ACl33+细胞的纯度在二次过柱后可达80%以上;2、两组细胞因子组合均能高效扩增脐带血AC133+细胞,在短期液体扩增体系中培养7d,(IL-3+SCF+FL)组合的扩增效率明显高于(IL-11+SCF+FL)组合;培养14d,ACl33+细胞的数量提升得更为显著。3、脐带血AC133+细胞表面趋化因子受体和粘附分子的表达在有细胞因子存在的条件下,经短期液体扩增培养后,CXCR4、CD49d、CD11a和CD62L的表达率较新鲜ACl33+细胞均有不同程度的增高,且( IL-3+SCF+FL )组合较(IL-11+SCF+FL)组合的表达率高,培养第14d CXCR4、CD62L的表达增高最明显。4、脐带血ACl33+细胞受照后,99%的细胞处于G0/G1期,加入细胞因子组合