猪苓菌丝体的几种酶活性及部分酶学性质的初步研究

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本试验以采自长白山区野生猪苓菌核经组织分离得到的猪苓纯培养菌种为试验试材。研究了不同培养时间、不同碳源及氮源对猪苓菌丝体几种胞外酶活性的影响,并采用均匀设计法对猪苓菌丝体的最适产漆酶及蛋白酶的培养条件进行了优化,同时对胞外漆酶及蛋白酶粗酶液部分酶学性质进行了初步研究。结果如下:1.猪苓菌丝体胞内β-1,3-葡聚糖酶的活性与菌丝体的生长呈正相关,且在菌丝旺盛生长的第4周时该酶酶活达到最大。在菌丝体培养第2周胞内几丁质酶达到酶活高峰,但其酶活性都很小。胞外蛋白酶在培养末期酶活性达最大。胞外纤维素酶系活性的变化趋势基本相似,在菌丝体生长的第1~2周活性较高。2.不同碳源、氮源培养基对蛋白酶、漆酶活性影响较大,以麦芽糖(双糖)为碳源和以蛋白胨(有机氮)为氮源时其蛋白酶、漆酶活性均较高。本试验中纤维素酶和多酚氧化酶类所表现出酶活性变化规律是否与猪苓菌丝的共生型真菌特性有关尚需进一步研究。3.本试验采用均匀试验设计法得到猪苓菌丝体最适产漆酶、蛋白酶培养条件为:培养液初始pH值7,培养温度30℃,培养29d。在最适培养条件下培养猪苓菌丝体,实测得胞外漆酶、蛋白酶酶活分别为0.25 U和6.13 U。4.猪苓菌丝体胞外蛋白酶的最适反应温度为45℃;适宜反应pH范围是7.0~8.0。5.猪苓菌丝体胞外漆酶反应的最适宜温度范围为45~50℃;最适反应pH范围是4.5~5.0。
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