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目的:
以肝癌HeP-A-22荷瘤小鼠为研究对象,通过对比应用参芪益肝煎、5—氟尿嘧啶(5—Fu)、生理盐水后移植瘤生长转移的情况,并观察参芪益肝煎对HeP-A-22肝癌小鼠的抑癌作用,及其对Survivin基因和CyclinD1基因表达的影响,并探讨本方剂抗癌的作用机制。
方法:
采取免疫组化技术和图像分析技术定量检测36只小鼠肝癌细胞中,细胞存活素(Survivin)基因和细胞周期素(CyclinD1)基因蛋白的表达。同时计算参芪益肝煎的抑瘤率,具体是在小鼠右腋下皮下种植瘤制作实体瘤模型,将36只小鼠平均分为3组:生理盐水组、参芪益肝煎组和5-氟脲嘧啶组各自12只,再用药14天后取出瘤块组织称重并计算抑瘤率。
结果:
从结果来看在对小鼠肝癌细胞种植瘤的抑制作用方面:参芪益肝煎组与对照组比较,参芪益肝煎组能显著抑制小鼠HeP-A-22肝癌细胞的肿瘤生长,作用机制主要跟小鼠Survivin基因和CyclinD1基因表达减弱有关,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,<0.01)。
结论:
1.在抑制肿瘤生长方面,参芪益肝煎组和对照组相比有明显的差异,参芪益肝煎组抑瘤率达到32.78%,此差异具有显著的统计学意义。
2.在Survivin基因的表达的影响方面,参芪益肝煎表现出能够减弱Survivin基因的表达。Survivin基因它可直接作用于半胱天冬酶,与激活的半胱天冬酶23和半胱天冬酶27结合,从而阻断凋亡过程,使细胞周期停滞。参芪益肝煎通过抑制细胞中Survivin基因的表达从而达到抑制肿瘤细胞增殖的作用。
3.在CyclinD1基因的表达的影响方面,参芪益肝煎能够下调种植瘤细胞中CyclinD1基因的表达。在细胞周期相关蛋白中,CyclinD1基因被认为是肿瘤G1期到S期最关键的因子,其基因和编码蛋白的异常,将引起细胞增殖周期失调,细胞周期的失调将导致肿瘤形成。参芪益肝煎通过抑制CyclinD1基因的表达从而达到抑制了肿瘤细胞的生长的作用。